• 快速、高效地合成cDNA
• 完全去除基因组DNA
• 每次反应只需使用25 ng总RNA，即可获得结果
• 获得的cDNA可直接用于real-time PCR
• RNA外参可监测酶抑制剂

RT² First Strand Kit可通过快速、方便的操作流程高效合成cDNA，并去除RNA样本中的基因组DNA。合成的cDNA可即用于多基因real-time PCR表达分析。

原理

RT² First Strand Kit可通过快速、方便的操作流程从mRNA高效合成cDNA，用于基因表达分析。

该试剂盒专有的操作流程，可在逆转录前有效去除RNA样本中的基因组DNA。使用随机引物和oligo-dT引物可进行无偏向性的逆转录，逆转录合成的cDNA产量高和长度合适。内置式RNA外参可帮助监测逆转录效率并检测酶抑制剂。RT² First Strand Kits非常适合基于real-time PCR的基因表达分析，可配合 RT² Profiler PCR Arrays、RT² qPCR Primer Assays和其他商业化基因表达分析使用。

操作流程

专有的Buffer GE与样本混合后在热循环仪上孵育。加入酶和另外的缓冲液后，样本可在多种热循环仪上逆转录。转录的cDNA可直接用于下游应用。推荐使用RT² Profiler PCR Arrays或RT² qPCR Primer进行进一步分析。

RT² First Strand Kits每次反应使用至少25 ng或至多5 µg总RNA都可获得结果。但是，最佳起始样本量取决于目标转录本的相对丰度。低丰度转录本需要较多 RNA；高丰度转录本需要较少RNA。在此方法的线性范围内，更大起始量的RNA可获得更多的阳性信号（如基因表达检测）。

应用

使用RT² First Strand Kit合成的cDNA可在多基因real-time PCR表达分析中获得出色的结果。