• 巢式PCR预扩增能够提高下游监测的灵敏度，减少假阳性结果
• 基于PCR技术的实验方案广泛适用于各实验室
• 附带的免费数据分析功能极大简化了突变检测

在使用qBiomarker Somatic Mutation PCR Arrays和Assays进行分析前，可使用qBiomarker PreAMP Synthesis Kit对12个含有少量或降解DNA的样本进行预扩增。该试剂盒可与qBiomarker PreAMP Mix配合使用，通过多重PCR预扩增位点特异性DNA模板。扩增产物可用qBiomarker Somatic Mutation PCR Arrays或Assays进行分析。

原理

有效的体细胞突变检测方法在对待检测样本进行分析时，需要将可能存在的突变位点从大量存在的野生型序列中检测区分出来。因此，影响此类实验的两大关键因素 为：样本中固有的突变DNA比例，以及检测方法的灵敏度。而在癌症研究中，作为肿瘤异质性的典型特征之一，肿瘤样本中的某一突变的频率可能十分之低。此 外，不同样本类型和来源中突变频率及可分析的DNA量也存在着不同。而实验方法的灵敏度则直接影响了样本DNA中可被检出的突变DNA量。

癌症研究中的常见样本类型包括福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）样本、血清样本、穿刺活检样本和分选细胞样本，这些类型的样本中通常只含有少量的可扩增 DNA。比方说，FFPE样本中的基因组DNA已经片段化，而血清样本中的DNA则浓度非常低。穿刺活检样本或分选细胞样本中的细胞含量少，因此所含的基 因组DNA量也较少。扩增基因组DNA为更加准确的检测这些类型样本中的DNA突变提供了可能。

操作流程

首先使用相应的QIAamp或DNeasy试剂盒，从FFPE样本、血清或其他类型的少量样本中分离DNA。之后使用Biomarker PreAMP Synthesis Kit和含有位点特异性引物的qBiomarker PreAMP Mix预扩增DNA。使用qBiomarker Somatic Mutation Arrays或Assays检测突变，将C_T值上传至GeneGlobe Data Analysis数据分析工具进行突变数据分析。

应用

qBiomarker Array PreAMP Mix特别适合在使用qBiomarker Somatic Mutation PCR Arrays和Assays前对于少量可扩增的DNA进行预扩增。推荐样本类型包括：

• FFPE样本
• 血浆、血清、尿液及其他无细胞体液样本
• 激光捕获显微切割样本
• 穿刺活检样本
• 流式细胞仪分选细胞样本