• 可靠且准确的生殖细胞系和体细胞CNV的相对定量
• 对微弱的拷贝数差异进行精确鉴别
• 包括独特的通用多拷贝定量对照
• 优化的试剂、对照和实验方案，防止假阳性/阴性

Type-it CNV SYBR Green Kit +qC Kit利用基于SYBR Green的qPCR，提供了人类基因组中所有生殖细胞系和体细胞拷贝数变异（CNVs）的相对定量的最终解决方案。试剂盒中提供的新型预混液确保了高 PCR效率和特异性。此外，试剂盒还包括通用对照分析，可实现可靠的CNV验证。对照分析中覆盖了多拷贝位点，无需对每个目的基因（GOI）的单拷贝对照 进行验证。优化的qPCR试剂和定量对照以及专用的实验方案，可确保敏感、可靠且精确的拷贝数定量结果。

原理

已知CNV可以影响约10–20%的人类基因组，且与多种类型的癌症和各种复杂的疾病（如自闭症和自身免疫性疾病）相关。定量PCR易于使用，且具有高敏 感度和可扩展性，通常是CNV验证及相关研究的理想选择。首先必须定义一个对照基因，假定该基因的拷贝数在所有比较样本中保持恒定。然后根据不同样本中 GOI和对照基因的C_T值差异计算目的基因的拷贝数变化（ΔΔC_T方法用于相对定量）。Type-it CNV SYBR Green PCR +qC Kit利用基于SYBR Green的qPCR，提供了准确的生殖细胞系和体细胞CNV的相对定量。Type-it CNV SYBR Green PCR +qC Kit包括高度特异性的预混液和正在申请专利的多拷贝定量对照分析，可实现各种样本中不同GOI拷贝数变化的可靠评估。采用任意real-time PCR仪，体验快速、便捷且可靠的CNV筛选（参见Successful screening of 9 different Coriell DNA samples和 表格“Type-it CNV SYBR Green PCR +qC Kit的特性”）。QIAGEN还提供了Type-it CNV SYBR Green PCR Core Kit，包括除Type-it CNV Reference Primer Assay外Type-it CNV SYBR Green PCR +qC Kit的所有组分。

高度特异的预混液

2x Type-it SYBR Green PCR Master Mix包括HotStarTaq Plus DNA Polymerase（可实现严格的热启动和高度特异且敏感的扩增）和新型PCR缓冲液和dNTP。Type-it CNV SYBR PCR Buffer采用了QIAGEN的双阳离子缓冲液体系，可确保PCR的高度特异性和效率。即用型预混液无需优化PCR参数，确保了每次使用均具有出众的 PCR性能（参见Type-it CNV Probe PCR +qC Kit outperforms kit from Supplier L）。 预混液还采用了QIAGEN的Q-Bond技术，以实现快速循环。通用多拷贝对照分析Type-it CNV Reference Primer Assay采用了分布于人类基因组中不同的染色体上的多拷贝遗传元件。Type-it CNV Reference Assay在不同人群中保持恒定，确保了应用的成功和通用性（参见Highly reliable multi-copy quantification control assay）。与典型的单拷贝对照基因相比，正在申请专利的多拷贝对照分析确保了在CNV定量中的出众可靠性，无需针对每个研究的GOI的对照分析进行优化和验证。

操作流程

Type-it CNV SYBR Green PCR Kit适用于各种PCR仪，包括Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪以及Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器（参见表格“合适的real-time PCR仪”）。只需采用GOI分析设置反应并遵循试剂盒中预先优化的实验方案，即可实现体细胞和生殖细胞系CNV鉴定。

合适的real-time PCR仪

供应商	PCR仪
QIAGEN	Rotor-Gene Q
Life Technologies	Applied Biosystems 7500 (all series), Applied Biosystems 7300 and 7300, ABI PRISM 7000 and 7700, Applied Biosystems StepOne and StepOnePlus, ViiA 7
Stratagene	Mx300P and Mx3005P
Bio-Rad	iCycler iQ, CFX
Roche	LightCycler 480, LightCycler 2
Eppendorf	RealPlex

利用快速直接的步骤获得精确的结果

Type-it CNV SYBR Green PCR Kit的独特组分确保了快速可靠的CNV验证和筛选（参见表格“Type-it CNV SYBR Green PCR + qC Kit的特性”）。采用专利性Q-Bond技术和严格的HotStarTaq Plus DNA Polymerase，PCR运行时间可缩短达40%。采用该试剂盒中简单的实验方案，无需再费时优化关键因素，如模板量和在不同PCR仪上的循环条件。 使用试剂盒提供的正在申请专利的通用定量对照分析，无需对每个单拷贝元件进行验证。这大大简化了拷贝数变化的计算，且准确度更高，同时可降低假阳性/阴性 的风险，从而节省时间和成本。

Type-it CNV SYBR Green PCR +qC Kit的特性

试剂盒成分	特点
2x Type-it SYBR Green PCR Master Mix	准确的CNV相对定量 适用于各种PCR仪
HotStarTaq Plus DNA Polymerase （预混液中包含）	室温设置 高度特异且敏感的PCR
Type-it CNV SYBR Green PCR Buffer （预混液中包含）	更高的特异性和效率 NH4+和K+浓度平衡 利用Q-Bond技术实现快速循环
Type-it CNV Reference Primer Assay	多拷贝元件用作通用的定量对照 无需对每个GOI对照进行优化

应用

人类基因组中的所有体细胞和生殖细胞CNV均可以采用Type-it SYBR Green PCR +qC Kit进行可靠定量，适用于各种应用领域，包括癌症研究、各种复杂疾病的研究，如自闭症和自身免疫性疾病。