• 高PCR特异性，无需优化
• 操作简单，室温下进行反应体系的构建
• 即用型预混液，减少移液步骤

HotStarTaq Master Mix包含HotStarTaq DNA Polymerase、可将优化需求最小化的独特的QIAGEN PCR Buffer、以及dNTPs。预混液中提供各种所需组分，减少移液步骤，降低污染风险，同时提高通量和可重复性。

原理

HotStarTaq Master Mix是一种即用型预混液，包含HotStarTaq DNA Polymerase、QIAGEN PCR Buffer和dNTPs。HotStarTaq DNA Polymerase是一种经修饰的Taq DNA Polymerase，确保热启动PCR的高特异性。

HotStarTaq DNA Polymerase

HotStarTaq DNA Polymerase以非活性形式提供，常温下没有聚合酶活性。避免PCR构建和循环初始阶段低温条件下非特异性引物的延伸和引物二聚体的形成（参见Superior performance in hot-start PCR和Higher specificity with different primer–template systems）。95°C条件下孵育15分钟即可激活HotStarTaq DNA Polymerase，这个步骤可整合入已有的热循环程序中。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer通过提高每个PCR扩增退火过程特异性引物的结合比例，确保PCR每个循环特异性扩增（参见Increased specificity of primer annealing）。独特的KCl和(NH₄)₂SO₄平衡组合，使得该缓冲液与传统的PCR缓冲液相比在很宽的温度和Mg²⁺浓度范围内都有严格的引物退火条件和高度的特异性，无需进行耗时的优化（参见Tolerance to variable magnesium concentration）。

操作流程

HotStarTaq Master Mix Kit以方便的预混液形式提供，易于使用。95°C条件下孵育15分钟即可激活HotStarTaq DNA Polymerase，可以整合入已有的热循环程序。在室温下应用该预混液可快速、简单地构建反应体系，只需将25 µl HotStarTaq Master Mix移入每个PCR反应管，并加入25 µl溶于该试剂盒提供的不含RNase的纯水中的引物和模板DNA（参见HotStarTaq procedure）。移液步骤最少化，降低操作误差和污染风险，确保提高通量和可重复性。该试剂盒提供高效、经优化的实验方案，用于快速、方便的PCR反应体系构建。

应用

HotStarTaq Master Mix Kit适合多种应用，包括各种富有挑战性的研究，如各种扩增应用：

• 复杂的基因模板
• 复杂的cDNA模板（如RT-PCR）
• 低拷贝的靶分子（如单细胞PCR）
• 多重引物对反应