二氢乙锭

二氢乙锭作为探针能有效地检测活性氧类。这种染料可以自由地进入细胞中，脱氢后成为溴化乙锭。该探针已经广泛地用于NK细胞，并且作为一种重要的染料用于鉴定肿瘤中细胞的增殖和低氧性。已经用中性粒细胞、内皮细胞，细胞HL60和巨噬细胞完成研究。这种探针的主要优点在于它能辨别过氧化物和H2O2；它在600nm附近发射荧光。Dihydroethidium是一种最常用的超氧化物阴离子荧光检测探针。可以直接用于活细胞的标记。Dihydroethidium被活细胞摄入后，可以在细胞内的超氧化物阴离子作用下脱氢，产生ethidium。Ethidium (例如溴化乙锭)可以和RNA或DNA结合产生红色荧光。当细胞内的超氧化物阴离子水平较高时，产生的ethidium较多，红色荧光就较强，反之则较弱。这样就可以用dihydroethidium进行超氧化物阴离子水平的检测。 Dihydroethidium本身为蓝色荧光，最大激发波长为370nm，最大发射波长为420nm，脱氢后和RNA或DNA 结合产生红色荧光，最大激发波长为300nm，最大发射波长为610nm，实际观察时也可以使用535nm作为激发波长。 Dihydroethidium可以溶解于DMSO，配制成适当的母液。 用于细胞内超氧化物阴离子检测时，Dihydroethidium的常用浓度为1-10μM。通常用含有0.5-5μM的 Dihydroethidium的适当溶液和细胞一起在37℃孵育30分钟左右进行荧光探针装载，随后可以适当洗涤，接着可以直接用流式细胞仪或其它适当荧光检测仪器进行检测。

Hydroethidine operates effectively as a probe for measurement of reactive oxygen species. The dye enters cells freely and is dehydrogenated to ethidium bromide. The probe has been used extensively with NK cell and as a vital dye for identification of proliferation and hypoxic cells in tumors. Studies have been performed using neutrophils and endothelial cells as well as HL60 cells and macrophages. A major advantage of this probe is its ability to distinguish between superoxide and H2O2. Fluorescence emission occurs at around 600 nm.
Redox indicator. Blue fluorescence until oxidized to ethidium