miScript SYBR Green PCR Kit (200) 货号:218073

miScript SYBR Green PCR Kit (200) 货号:218073

miScript SYBR Green PCR Kit (200)

货  号:218073

产品规格:200

原  产  地:德国

参考价格:5380 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

miScript SYBR Green PCR Kit (200)

218073

配合miScript PCR System,使用real-time PCR方法检测miRNA

  • 灵敏并特异性定量检测miRNA
  • 利用单一cDNA定量检测多种miRNA
  • 利用同一cDNA定量检测miRNA和mRNA
  • 包含ROX染料,可用于标准化荧光结果

miScript SYBR Green PCR Kit是miScript PCR System不可缺少的部分,用于定量检测miRNA。该试剂盒基于经验证的QuantiTect SYBR Green Kits技术。miScript II RT Kit得到的cDNA作为模板,配合miScript SYBR Green PCR Kit和PCR芯片(miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays)或适当的检测(用于miRNA或其它非编码RNA的miScript Primer Assays、用于miRNA前体的miScript Precursor Assays或用于mRNA的QuantiTect Primer Assays)进行real-time PCR。

原理

miScript PCR System配合SYBR Green-based real-time PCR,灵敏和特异性的定量和分析miRNA。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA和后续的real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。

miScript PCR System包含以下组分:

miScript II RT Kit,可简单、单步合成cDNA。单个cDNA合成反应可用于检测数以百计的miRNAs。双缓冲体系满足使用real-time PCR进行miRNA定量的独特要求。
miScript SYBR Green PCR Kit,包含QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和反向引物miScript Universal Primer,配合miScript Primer Assay或miScript miRNA PCR Array进行miRNAs检测。
miScript Primer Assay或miScript Precursor Assay,包含 QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和反向引物miScript Universal Primer,配合miScript Primer Assay或miScript miRNA PCR Array进行miRNAs检测。
miScript miRNA PCR Array,miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays被预先设定,单次使用的PCR芯片可快速分析成熟miRNAs。
miScript miRNA PCR Array数据分析仪,免费的基于网络的工具,简化了用于miScript miRNA PCR Arrays相对定量的ΔΔCT方法。

Real-time PCR检测miRNA

miScript SYBR Green PCR Kit包含QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和miScript Universal Primer,该引物对在逆转录反应中加入到cDNA的5’端的通用标签序列有特异性。单次cDNA合成反应足够用于许多miRNAs。使用 miScript HiSpec Buffer制备的cDNA,配合miScript miRNA PCR Arrays或miScript Primer Assays可用于定量成熟miRNA。使用miScript HiFlex Buffer制备的cDNA配合real-time PCR步骤中合适的引物:用于miRNA或其它非编码RNA的miScript Primer Assays、用于miRNA前体的miScript Precursor Assays或用于mRNA的QuantiTect Primer Assays,可用于检测不同种类的RNA。 

操作流程

使用the miScript II RT Kit进行逆转录反应,得到的cDNA作为模板,配合miScript SYBR Green PCR Kit和合适的miScript Primer Assays和miScript miRNA PCR Arrays进行real-time PCR。使得miRNA定量和分析简单可行,实验室的real-time PCR循环仪上均可进行。

应用

miScript SYBR Green PCR Kit作为miScript PCR System的一部分,用于:

  • 成熟miRNA的定量检测和谱分析
  • 同时检测miRNA和mRNA
  • 同时检测miRNA和miRNA前体
  • 检测snoRNA和其他非编码RNA

产品详细信息

miScript SYBR Green PCR Kit (200)

218073

配合miScript PCR System,使用real-time PCR方法检测miRNA

  • 灵敏并特异性定量检测miRNA
  • 利用单一cDNA定量检测多种miRNA
  • 利用同一cDNA定量检测miRNA和mRNA
  • 包含ROX染料,可用于标准化荧光结果

miScript SYBR Green PCR Kit是miScript PCR System不可缺少的部分,用于定量检测miRNA。该试剂盒基于经验证的QuantiTect SYBR Green Kits技术。miScript II RT Kit得到的cDNA作为模板,配合miScript SYBR Green PCR Kit和PCR芯片(miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays)或适当的检测(用于miRNA或其它非编码RNA的miScript Primer Assays、用于miRNA前体的miScript Precursor Assays或用于mRNA的QuantiTect Primer Assays)进行real-time PCR。

原理

miScript PCR System配合SYBR Green-based real-time PCR,灵敏和特异性的定量和分析miRNA。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA和后续的real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。

miScript PCR System包含以下组分:

miScript II RT Kit,可简单、单步合成cDNA。单个cDNA合成反应可用于检测数以百计的miRNAs。双缓冲体系满足使用real-time PCR进行miRNA定量的独特要求。
miScript SYBR Green PCR Kit,包含QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和反向引物miScript Universal Primer,配合miScript Primer Assay或miScript miRNA PCR Array进行miRNAs检测。
miScript Primer Assay或miScript Precursor Assay,包含 QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和反向引物miScript Universal Primer,配合miScript Primer Assay或miScript miRNA PCR Array进行miRNAs检测。
miScript miRNA PCR Array,miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays被预先设定,单次使用的PCR芯片可快速分析成熟miRNAs。
miScript miRNA PCR Array数据分析仪,免费的基于网络的工具,简化了用于miScript miRNA PCR Arrays相对定量的ΔΔCT方法。

Real-time PCR检测miRNA

miScript SYBR Green PCR Kit包含QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和miScript Universal Primer,该引物对在逆转录反应中加入到cDNA的5’端的通用标签序列有特异性。单次cDNA合成反应足够用于许多miRNAs。使用 miScript HiSpec Buffer制备的cDNA,配合miScript miRNA PCR Arrays或miScript Primer Assays可用于定量成熟miRNA。使用miScript HiFlex Buffer制备的cDNA配合real-time PCR步骤中合适的引物:用于miRNA或其它非编码RNA的miScript Primer Assays、用于miRNA前体的miScript Precursor Assays或用于mRNA的QuantiTect Primer Assays,可用于检测不同种类的RNA。 

操作流程

使用the miScript II RT Kit进行逆转录反应,得到的cDNA作为模板,配合miScript SYBR Green PCR Kit和合适的miScript Primer Assays和miScript miRNA PCR Arrays进行real-time PCR。使得miRNA定量和分析简单可行,实验室的real-time PCR循环仪上均可进行。

应用

miScript SYBR Green PCR Kit作为miScript PCR System的一部分,用于:

  • 成熟miRNA的定量检测和谱分析
  • 同时检测miRNA和mRNA
  • 同时检测miRNA和miRNA前体
  • 检测snoRNA和其他非编码RNA

miScript Plant RT Kit (50) 货号:218761

miScript Plant RT Kit (50) 货号:218761

miScript Plant RT Kit (50)

货  号:218761

产品规格:50

原  产  地:德国

参考价格:5440 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

miScript Plant RT Kit (50)

218761

用于植物miRNA和其他3’端修饰的小RNA的cDNA合成

  • 可针对3’端甲基化(2′-O-Me)修饰的小RNA进行通用型cDNA合成 
  • 可凭借单一cDNA合成反应进行成熟植物miRNA表达谱分析
  • 可凭借单一cDNA合成反应进行piRNA的表达谱分析
miScript Plant RT Kit是针对具有3’端甲基化(2′-O-Me)修饰的小RNA进行无偏差 cDNA合成的通用型试剂盒。本试剂盒专为基于实时定量PCR技术的小RNA表达分析应用设计和优化,能够配合miScript SYBR Green PCR Kit和miScript miRNA PCR Array或miScript Primer Assay等产品使用。这一类通过功能验证的分析和芯片产品可应用于水稻、玉米、大豆、烟草和其他一些重要农业作物的检测,以及植物学相关的研究。在3’ 末端碱基具有2′-O-Me甲基化修饰的小RNA(如植物成熟miRNA和piwi互作RNA (piRNA))中,一般不具有poly A尾结构,因此无法通过多聚腺苷酸依赖的cDNA合成方法有效地反转录。专用的miScript Plant RT Kit通过首先向植物miRNA的3’末端连接一个接头解决了这一难题。不同于多聚腺苷酸化,这一链接反应不会受到植物miRNA 3’末端碱基上存在的2′-O-Me甲基化修饰的负面抑制。接头一旦连接成功,即可实现反转录反应。

原理
成熟的miRNA一般是长度为22个碱基的非编码RNA,能够介导转录后的基因调控。植物的miRNA和piRNA会在其3’末端碱基上形成2′-O- Me形式的甲基化修饰。因此,植物miRNA和piRNA的通用cDNA合成,需要通过连接反应来实现后续的反转录反应。

连接反应介导的反转录

miScript Plant RT Kit包含了针对植物成熟miRNA样本进行连接反应介导的通用型反转录所需的全部试剂;这些试剂包括10x miScript Ligation Buffer,10x miScript Plant Adaptor,2x miScript Ligation Activator,miScript Plant RNA Ligase,10x miScript Plant RT Nucleics,5x miScript Plant RT Buffer以及miScript Plant Reverse Transcriptase。进行连接反应介导的反转录时,小RNA被选择性地转换为cDNA。在反应的第一步,成熟的miRNA与一个接头相连接。在反 应的第二步,连接好的miRNA被反转录为cDNA。

10x miScript Plant Adaptor包含了一个经过优化的预腺苷化接头,及一个人工合成的对照RNA(miScript Plant Ligation Control [miPLC]),后者被用于评估连接反应介导的反转录的反应性能。10x miScript Plant RT Nucleics包含了dNTPs、RT引物和一个合成的RNA-DNA杂交内参(miScript Plant Reverse-Transcription Control [miPRC]),后者也被用于检测反转录的反应性能。我们的5x miScript Plant RT Buffer产品具有正在申请专利的特有配方,能够促进成熟miRNA向cDNA的选择性转化,从而实现后续使用miScript miRNA PCR Array或miScript Primer Assay的miRNA定量操作。  

通过real-time PCR进行miRNA的表达谱分析

使用miScript miRNA PCR Array(其中包含针对特定miRNA的miScript Primer Assay)和miScript SYBR Green Kit(其中包含miScript Universal Primer(反转录引物)和QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix)进行real-time PCR分析时,可采用miScript Plant RT Kit制备的cDNA做为模板。需要鉴定成熟miRNA的表达谱时,可向miScript miRNA PCR Array中加入含有cDNA、miScript Universal Primer、QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和去RNA酶水的混合物。

通过real-time PCR进行miRNA表达水平的定量

使用植物的miScript Primer Assay和miScript SYBR Green Kit产品进行Real-time PCR分析时,使用miScript Plant RT Kit制备的cDNA可做为模板。需要对成熟miRNA的表达水平进行定量时,可制备含有cDNA、miScript Primer Assay、miScript Universal Primer、QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和去RNA酶水的混合物,并加入到PCR反应管、Rotor-Disc或平板中。

操作流程
反转录反应可方便地进行。通常在连接反应介导的反转录反应中,一般使用含有3’端2′-O-Me修饰小RNA的总RNA做为起始材料。反转录是一个简单直 接的操作步骤,包含了37℃下1小时的温育反应,以及之后在95℃下通过短暂孵育对反应进行失活。

应用
miScript Plant RT Kit通常做为miScript Plant PCR System的一部分,用于进行:

  • 植物成熟miRNA的定量和表达谱分析
  • piRNA的定量和表达谱分析

产品详细信息

miScript Plant RT Kit (50)

218761

用于植物miRNA和其他3’端修饰的小RNA的cDNA合成

  • 可针对3’端甲基化(2′-O-Me)修饰的小RNA进行通用型cDNA合成 
  • 可凭借单一cDNA合成反应进行成熟植物miRNA表达谱分析
  • 可凭借单一cDNA合成反应进行piRNA的表达谱分析
miScript Plant RT Kit是针对具有3’端甲基化(2′-O-Me)修饰的小RNA进行无偏差 cDNA合成的通用型试剂盒。本试剂盒专为基于实时定量PCR技术的小RNA表达分析应用设计和优化,能够配合miScript SYBR Green PCR Kit和miScript miRNA PCR Array或miScript Primer Assay等产品使用。这一类通过功能验证的分析和芯片产品可应用于水稻、玉米、大豆、烟草和其他一些重要农业作物的检测,以及植物学相关的研究。在3’ 末端碱基具有2′-O-Me甲基化修饰的小RNA(如植物成熟miRNA和piwi互作RNA (piRNA))中,一般不具有poly A尾结构,因此无法通过多聚腺苷酸依赖的cDNA合成方法有效地反转录。专用的miScript Plant RT Kit通过首先向植物miRNA的3’末端连接一个接头解决了这一难题。不同于多聚腺苷酸化,这一链接反应不会受到植物miRNA 3’末端碱基上存在的2′-O-Me甲基化修饰的负面抑制。接头一旦连接成功,即可实现反转录反应。

原理
成熟的miRNA一般是长度为22个碱基的非编码RNA,能够介导转录后的基因调控。植物的miRNA和piRNA会在其3’末端碱基上形成2′-O- Me形式的甲基化修饰。因此,植物miRNA和piRNA的通用cDNA合成,需要通过连接反应来实现后续的反转录反应。

连接反应介导的反转录

miScript Plant RT Kit包含了针对植物成熟miRNA样本进行连接反应介导的通用型反转录所需的全部试剂;这些试剂包括10x miScript Ligation Buffer,10x miScript Plant Adaptor,2x miScript Ligation Activator,miScript Plant RNA Ligase,10x miScript Plant RT Nucleics,5x miScript Plant RT Buffer以及miScript Plant Reverse Transcriptase。进行连接反应介导的反转录时,小RNA被选择性地转换为cDNA。在反应的第一步,成熟的miRNA与一个接头相连接。在反 应的第二步,连接好的miRNA被反转录为cDNA。

10x miScript Plant Adaptor包含了一个经过优化的预腺苷化接头,及一个人工合成的对照RNA(miScript Plant Ligation Control [miPLC]),后者被用于评估连接反应介导的反转录的反应性能。10x miScript Plant RT Nucleics包含了dNTPs、RT引物和一个合成的RNA-DNA杂交内参(miScript Plant Reverse-Transcription Control [miPRC]),后者也被用于检测反转录的反应性能。我们的5x miScript Plant RT Buffer产品具有正在申请专利的特有配方,能够促进成熟miRNA向cDNA的选择性转化,从而实现后续使用miScript miRNA PCR Array或miScript Primer Assay的miRNA定量操作。  

通过real-time PCR进行miRNA的表达谱分析

使用miScript miRNA PCR Array(其中包含针对特定miRNA的miScript Primer Assay)和miScript SYBR Green Kit(其中包含miScript Universal Primer(反转录引物)和QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix)进行real-time PCR分析时,可采用miScript Plant RT Kit制备的cDNA做为模板。需要鉴定成熟miRNA的表达谱时,可向miScript miRNA PCR Array中加入含有cDNA、miScript Universal Primer、QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和去RNA酶水的混合物。

通过real-time PCR进行miRNA表达水平的定量

使用植物的miScript Primer Assay和miScript SYBR Green Kit产品进行Real-time PCR分析时,使用miScript Plant RT Kit制备的cDNA可做为模板。需要对成熟miRNA的表达水平进行定量时,可制备含有cDNA、miScript Primer Assay、miScript Universal Primer、QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和去RNA酶水的混合物,并加入到PCR反应管、Rotor-Disc或平板中。

操作流程
反转录反应可方便地进行。通常在连接反应介导的反转录反应中,一般使用含有3’端2′-O-Me修饰小RNA的总RNA做为起始材料。反转录是一个简单直 接的操作步骤,包含了37℃下1小时的温育反应,以及之后在95℃下通过短暂孵育对反应进行失活。

应用
miScript Plant RT Kit通常做为miScript Plant PCR System的一部分,用于进行:

  • 植物成熟miRNA的定量和表达谱分析
  • piRNA的定量和表达谱分析

miScript II RT Kit (12) 货号:218160

miScript II RT Kit (12) 货号:218160

miScript II RT Kit (12)

货  号:218160

产品规格:12

原  产  地:德国

参考价格:1450 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

miScript II RT Kit (12)

218160

使用miScript PCR System,对包含miRNA的总RNA进行逆转录

  • 灵敏和特异性的检测miRNA
  • 利用单一cDNA定量检测多种miRNA
  • 利用同一cDNA定量检测miRNA和mRNA
  • 利用同一cDNA定量检测成熟miRNA和miRNA前体
  • 专有技术合成RNA,评估逆转录效率

miScript II RT Kit是miScript PCR System的重要组成部分,用于miRNA定量检测。配合miScript SYBR Green PCR Kit和miScript PCRarrays(miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays)或所需的检测(用于miRNA或其他非编码RNA的miScript Primer Assays、用于miRNA前体的miScript Precursor Assays或用于mRNA的QuantiTect Primer Assays),miScript II RT Kit合成的cDNA可作为real-time PCR 的模板。

原理

miScript PCR System应用SYBR Green-based real-time PCR,能够灵敏和特异性地进行miRNA的定量和谱分析。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA及后续的real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。

miScript PCR System包含以下组分:

miScript II RT Kit,可简单、单步合成cDNA。单个cDNA合成反应可用于检测数以百计的miRNAs。双缓冲体系满足使用real-time PCR进行miRNA定量的独特要求。
miScript SYBR Green PCR Kit,包含QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和反向引物miScript Universal Primer,配合miScript Primer Assay或miScript miRNA PCR Array进行miRNAs检测。
miScript Primer Assay或miScript Precursor Assay,前者为miRNA特异性正向引物,用于检测成熟miRNAs。后者包含正向和反向引物,靶向作用于miRNA前体的颈环序列。该产品使用miRBase中的最新序列信息设计。
miScript miRNA PCR Array,miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays被预先设定,单次使用的PCR孔板/孔盘可快速分析成熟miRNAs。
miScript miRNA PCR Array data analysis tool,免费的基于网络的工具,简化了用于miScript miRNA PCR Arrays相对定量的ΔΔCT方法。

miScript II RT Kit双缓冲体系

miScript II RT Kit包含miScript Reverse Transcriptase Mix、10x miScript Nucleics Mix、5x miScript HiSpec Buffer和5x miScript HiFlex Buffer。miScript Reverse Transcriptase Mix是一种经优化的poly(A)聚合酶和逆转录酶混合物。miScript Nucleics Mix包含dNTPs、rATP、oligo-dT引物和内部合成RNA对照(miRNA逆转录对照[miRTC]),可评估使用miScript miRNA PCR Arrays进行谱分析实验的逆转录性能(获取更多信息,请参考miScript miRNA PCR Array Handbook)。

miScript II RT Kit提供两种缓冲液:miScript HiSpec Buffer和miScript HiFlex Buffer,满足使用real-time PCR进行miRNA定量研究的特别要求(参见miScript II RT Kit buffers)。 miScript HiSpec Buffer配合miScript miRNA PCR Arrays和miScript Primer Assays进行成熟miRNA谱分析和定量实验时,提供理想的结果。miScript HiFlex Buffer适合于低通量miRNA定量实验,从同一样本进行如miRNA、mRNA和前体miRNA等不同种类的RNA的定量实验除外。

miScript HiSpec Buffer进行逆转录实验

使用miScript HiSpec Buffer进行逆转录反应,确保成熟miRNAs的选择性转化,miScript PCR Controls靶向转至cDNA。使用oligo-dT引物,成熟miRNAs通过poly(A)聚合酶加尾后,被逆转录至cDNA(参见Selective conversion of mature miRNAs into cDNA in miScript HiSpec Buffer)。 加尾和逆转录在同一试管内同时进行。oligo-dT引物有一个3’退化锚点和一个在5’端的通用标签序列,可在real-time PCR步骤扩增成熟miRNA。miScript Primer Assays配合miScript SYBR Green PCR Kit,确保通过real-time PCR灵敏、特异性的定量miRNA。加尾和通用标签保证miScript Primer Assays不会检测到基因组DNA。

miScript HiFlex Buffer进行逆转录实验

使用miScript HiFlex Buffer进行逆转录反应,可使所有种类的RNA转化至cDNA(参见Simultaneous conversion of all RNA species into cDNA in miScript HiFlex Buffer)。 使用oligo-dT引物,成熟miRNAs通过poly(A) 聚合酶加尾后,被逆转录至cDNA。加尾和逆转录在同一试管内同时进行。oligo-dT引物有一个3’退化锚点和一个在5’端的通用标签序列,可在 real-time PCR步骤扩增成熟miRNA。miScript Primer Assays配合miScript SYBR Green PCR Kit,确保通过real-time PCR定量miRNA。加尾和通用标签确保miScript Primer Assays不会检测到基因组DNA。其它种类RNA(包括miRNA前体、其它非编码RNA和mRNA)使用oligo-dT和随机引物转化至 cDNA。配合miScript SYBR Green PCR Kit,使用合适的检测进行real-time PCR的RNAs检测(如用于非编码RNA检测的miScript Primer Assays 、用于miRNA前体检测的miScript Precursor Assays和用于mRNA检测的QuantiTect Primer Assays)。

操作流程
逆转录反应操作简单。包含miRNA的总RNA作为逆转录反应的起始材料。逆转录是一个简单的流程,包括在37oC条件下进行1个小时的孵育反应及在95oC条件下的简单孵育后进行的灭活反应。

应用

miScript II RT Kit作为miScript PCR System的一部分,用于:

  • 成熟miRNA定量检测和谱分析
  • 同时检测miRNA和mRNA
  • 同时检测成熟miRNA和miRNA前体
  • 检测snoRNA和其他非编码RNA

产品详细信息

miScript II RT Kit (12)

218160

使用miScript PCR System,对包含miRNA的总RNA进行逆转录

  • 灵敏和特异性的检测miRNA
  • 利用单一cDNA定量检测多种miRNA
  • 利用同一cDNA定量检测miRNA和mRNA
  • 利用同一cDNA定量检测成熟miRNA和miRNA前体
  • 专有技术合成RNA,评估逆转录效率

miScript II RT Kit是miScript PCR System的重要组成部分,用于miRNA定量检测。配合miScript SYBR Green PCR Kit和miScript PCRarrays(miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays)或所需的检测(用于miRNA或其他非编码RNA的miScript Primer Assays、用于miRNA前体的miScript Precursor Assays或用于mRNA的QuantiTect Primer Assays),miScript II RT Kit合成的cDNA可作为real-time PCR 的模板。

原理

miScript PCR System应用SYBR Green-based real-time PCR,能够灵敏和特异性地进行miRNA的定量和谱分析。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA及后续的real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。

miScript PCR System包含以下组分:

miScript II RT Kit,可简单、单步合成cDNA。单个cDNA合成反应可用于检测数以百计的miRNAs。双缓冲体系满足使用real-time PCR进行miRNA定量的独特要求。
miScript SYBR Green PCR Kit,包含QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和反向引物miScript Universal Primer,配合miScript Primer Assay或miScript miRNA PCR Array进行miRNAs检测。
miScript Primer Assay或miScript Precursor Assay,前者为miRNA特异性正向引物,用于检测成熟miRNAs。后者包含正向和反向引物,靶向作用于miRNA前体的颈环序列。该产品使用miRBase中的最新序列信息设计。
miScript miRNA PCR Array,miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays被预先设定,单次使用的PCR孔板/孔盘可快速分析成熟miRNAs。
miScript miRNA PCR Array data analysis tool,免费的基于网络的工具,简化了用于miScript miRNA PCR Arrays相对定量的ΔΔCT方法。

miScript II RT Kit双缓冲体系

miScript II RT Kit包含miScript Reverse Transcriptase Mix、10x miScript Nucleics Mix、5x miScript HiSpec Buffer和5x miScript HiFlex Buffer。miScript Reverse Transcriptase Mix是一种经优化的poly(A)聚合酶和逆转录酶混合物。miScript Nucleics Mix包含dNTPs、rATP、oligo-dT引物和内部合成RNA对照(miRNA逆转录对照[miRTC]),可评估使用miScript miRNA PCR Arrays进行谱分析实验的逆转录性能(获取更多信息,请参考miScript miRNA PCR Array Handbook)。

miScript II RT Kit提供两种缓冲液:miScript HiSpec Buffer和miScript HiFlex Buffer,满足使用real-time PCR进行miRNA定量研究的特别要求(参见miScript II RT Kit buffers)。 miScript HiSpec Buffer配合miScript miRNA PCR Arrays和miScript Primer Assays进行成熟miRNA谱分析和定量实验时,提供理想的结果。miScript HiFlex Buffer适合于低通量miRNA定量实验,从同一样本进行如miRNA、mRNA和前体miRNA等不同种类的RNA的定量实验除外。

miScript HiSpec Buffer进行逆转录实验

使用miScript HiSpec Buffer进行逆转录反应,确保成熟miRNAs的选择性转化,miScript PCR Controls靶向转至cDNA。使用oligo-dT引物,成熟miRNAs通过poly(A)聚合酶加尾后,被逆转录至cDNA(参见Selective conversion of mature miRNAs into cDNA in miScript HiSpec Buffer)。 加尾和逆转录在同一试管内同时进行。oligo-dT引物有一个3’退化锚点和一个在5’端的通用标签序列,可在real-time PCR步骤扩增成熟miRNA。miScript Primer Assays配合miScript SYBR Green PCR Kit,确保通过real-time PCR灵敏、特异性的定量miRNA。加尾和通用标签保证miScript Primer Assays不会检测到基因组DNA。

miScript HiFlex Buffer进行逆转录实验

使用miScript HiFlex Buffer进行逆转录反应,可使所有种类的RNA转化至cDNA(参见Simultaneous conversion of all RNA species into cDNA in miScript HiFlex Buffer)。 使用oligo-dT引物,成熟miRNAs通过poly(A) 聚合酶加尾后,被逆转录至cDNA。加尾和逆转录在同一试管内同时进行。oligo-dT引物有一个3’退化锚点和一个在5’端的通用标签序列,可在 real-time PCR步骤扩增成熟miRNA。miScript Primer Assays配合miScript SYBR Green PCR Kit,确保通过real-time PCR定量miRNA。加尾和通用标签确保miScript Primer Assays不会检测到基因组DNA。其它种类RNA(包括miRNA前体、其它非编码RNA和mRNA)使用oligo-dT和随机引物转化至 cDNA。配合miScript SYBR Green PCR Kit,使用合适的检测进行real-time PCR的RNAs检测(如用于非编码RNA检测的miScript Primer Assays 、用于miRNA前体检测的miScript Precursor Assays和用于mRNA检测的QuantiTect Primer Assays)。

操作流程
逆转录反应操作简单。包含miRNA的总RNA作为逆转录反应的起始材料。逆转录是一个简单的流程,包括在37oC条件下进行1个小时的孵育反应及在95oC条件下的简单孵育后进行的灭活反应。

应用

miScript II RT Kit作为miScript PCR System的一部分,用于:

  • 成熟miRNA定量检测和谱分析
  • 同时检测miRNA和mRNA
  • 同时检测成熟miRNA和miRNA前体
  • 检测snoRNA和其他非编码RNA

miScript PCR Starter Kit (80) 货号:218193

miScript PCR Starter Kit (80) 货号:218193

miScript PCR Starter Kit (80)

货  号:218193

产品规格:80

原  产  地:德国

参考价格:1900 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

miScript PCR Starter Kit (80)

218193

用于设置和优化miRNA定量实验

  • 便利的设置miRNA定量实验
  • 易于监控、优化miRNA定量实验
  • 可靠的阳性参照和标准化参照

miScript PCR Starter Kit适合于miRNA研究领域的研究人员,提供所有miRNA定量分析需要的成分。该试剂盒包含逆转录反应和real-time PCR所需的试剂、用于标准化的RNU6-2 的miScript PCR Control和检测人类miR-15a的miScript Primer Assay。

原理

miScript PCR System配合SYBR® Green-based real-time PCR,简单的进行miRNA定量和分析。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA和使用SYBR® Green法real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。miScript PCR Starter Kit配合以单个试剂盒形式提供的miScript PCR System的重要组件,在研究者定量目的miRNA之前进行miR-15a定量和结果的标准化。

操作流程

使用miScript HiSpec Buffer或miScript HiFlex Buffer进行逆转录反应得到的cDNA,作为real-time PCR模板。使用人类miR-15a-specific miScript Primer Assay(正向引物)和miScript Universal Primer(反向引物)配合QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix进行Real-time PCR。如需标准化,使用人类RNU6-2 (RNU6B) miScript Primer Assay和miScript Universal Primer配合QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix同时进行反应即可。

应用
  • 设置miRNA定量实验
  • miRNA对照实验

产品详细信息

miScript PCR Starter Kit (80)

218193

用于设置和优化miRNA定量实验

  • 便利的设置miRNA定量实验
  • 易于监控、优化miRNA定量实验
  • 可靠的阳性参照和标准化参照

miScript PCR Starter Kit适合于miRNA研究领域的研究人员,提供所有miRNA定量分析需要的成分。该试剂盒包含逆转录反应和real-time PCR所需的试剂、用于标准化的RNU6-2 的miScript PCR Control和检测人类miR-15a的miScript Primer Assay。

原理

miScript PCR System配合SYBR® Green-based real-time PCR,简单的进行miRNA定量和分析。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA和使用SYBR® Green法real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。miScript PCR Starter Kit配合以单个试剂盒形式提供的miScript PCR System的重要组件,在研究者定量目的miRNA之前进行miR-15a定量和结果的标准化。

操作流程

使用miScript HiSpec Buffer或miScript HiFlex Buffer进行逆转录反应得到的cDNA,作为real-time PCR模板。使用人类miR-15a-specific miScript Primer Assay(正向引物)和miScript Universal Primer(反向引物)配合QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix进行Real-time PCR。如需标准化,使用人类RNU6-2 (RNU6B) miScript Primer Assay和miScript Universal Primer配合QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix同时进行反应即可。

应用
  • 设置miRNA定量实验
  • miRNA对照实验

miScript II RT Kit (50) 货号:218161

miScript II RT Kit (50) 货号:218161

miScript II RT Kit (50)

货  号:218161

产品规格:50

原  产  地:德国

参考价格:5390 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

miScript II RT Kit (50)

218161

使用miScript PCR System,对包含miRNA的总RNA进行逆转录

  • 灵敏和特异性的检测miRNA
  • 利用单一cDNA定量检测多种miRNA
  • 利用同一cDNA定量检测miRNA和mRNA
  • 利用同一cDNA定量检测成熟miRNA和miRNA前体
  • 专有技术合成RNA,评估逆转录效率

miScript II RT Kit是miScript PCR System的重要组成部分,用于miRNA定量检测。配合miScript SYBR Green PCR Kit和miScript PCRarrays(miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays)或所需的检测(用于miRNA或其他非编码RNA的miScript Primer Assays、用于miRNA前体的miScript Precursor Assays或用于mRNA的QuantiTect Primer Assays),miScript II RT Kit合成的cDNA可作为real-time PCR 的模板。

原理

miScript PCR System应用SYBR Green-based real-time PCR,能够灵敏和特异性地进行miRNA的定量和谱分析。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA及后续的real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。

miScript PCR System包含以下组分:

miScript II RT Kit,可简单、单步合成cDNA。单个cDNA合成反应可用于检测数以百计的miRNAs。双缓冲体系满足使用real-time PCR进行miRNA定量的独特要求。
miScript SYBR Green PCR Kit,包含QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和反向引物miScript Universal Primer,配合miScript Primer Assay或miScript miRNA PCR Array进行miRNAs检测。
miScript Primer Assay或miScript Precursor Assay,前者为miRNA特异性正向引物,用于检测成熟miRNAs。后者包含正向和反向引物,靶向作用于miRNA前体的颈环序列。该产品使用miRBase中的最新序列信息设计。
miScript miRNA PCR Array,miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays被预先设定,单次使用的PCR孔板/孔盘可快速分析成熟miRNAs。
miScript miRNA PCR Array data analysis tool,免费的基于网络的工具,简化了用于miScript miRNA PCR Arrays相对定量的ΔΔCT方法。

miScript II RT Kit双缓冲体系

miScript II RT Kit包含miScript Reverse Transcriptase Mix、10x miScript Nucleics Mix、5x miScript HiSpec Buffer和5x miScript HiFlex Buffer。miScript Reverse Transcriptase Mix是一种经优化的poly(A)聚合酶和逆转录酶混合物。miScript Nucleics Mix包含dNTPs、rATP、oligo-dT引物和内部合成RNA对照(miRNA逆转录对照[miRTC]),可评估使用miScript miRNA PCR Arrays进行谱分析实验的逆转录性能(获取更多信息,请参考miScript miRNA PCR Array Handbook)。

miScript II RT Kit提供两种缓冲液:miScript HiSpec Buffer和miScript HiFlex Buffer,满足使用real-time PCR进行miRNA定量研究的特别要求(参见miScript II RT Kit buffers)。 miScript HiSpec Buffer配合miScript miRNA PCR Arrays和miScript Primer Assays进行成熟miRNA谱分析和定量实验时,提供理想的结果。miScript HiFlex Buffer适合于低通量miRNA定量实验,从同一样本进行如miRNA、mRNA和前体miRNA等不同种类的RNA的定量实验除外。

miScript HiSpec Buffer进行逆转录实验

使用miScript HiSpec Buffer进行逆转录反应,确保成熟miRNAs的选择性转化,miScript PCR Controls靶向转至cDNA。使用oligo-dT引物,成熟miRNAs通过poly(A)聚合酶加尾后,被逆转录至cDNA(参见Selective conversion of mature miRNAs into cDNA in miScript HiSpec Buffer)。 加尾和逆转录在同一试管内同时进行。oligo-dT引物有一个3’退化锚点和一个在5’端的通用标签序列,可在real-time PCR步骤扩增成熟miRNA。miScript Primer Assays配合miScript SYBR Green PCR Kit,确保通过real-time PCR灵敏、特异性的定量miRNA。加尾和通用标签保证miScript Primer Assays不会检测到基因组DNA。

miScript HiFlex Buffer进行逆转录实验

使用miScript HiFlex Buffer进行逆转录反应,可使所有种类的RNA转化至cDNA(参见Simultaneous conversion of all RNA species into cDNA in miScript HiFlex Buffer)。 使用oligo-dT引物,成熟miRNAs通过poly(A) 聚合酶加尾后,被逆转录至cDNA。加尾和逆转录在同一试管内同时进行。oligo-dT引物有一个3’退化锚点和一个在5’端的通用标签序列,可在 real-time PCR步骤扩增成熟miRNA。miScript Primer Assays配合miScript SYBR Green PCR Kit,确保通过real-time PCR定量miRNA。加尾和通用标签确保miScript Primer Assays不会检测到基因组DNA。其它种类RNA(包括miRNA前体、其它非编码RNA和mRNA)使用oligo-dT和随机引物转化至 cDNA。配合miScript SYBR Green PCR Kit,使用合适的检测进行real-time PCR的RNAs检测(如用于非编码RNA检测的miScript Primer Assays 、用于miRNA前体检测的miScript Precursor Assays和用于mRNA检测的QuantiTect Primer Assays)。

操作流程
逆转录反应操作简单。包含miRNA的总RNA作为逆转录反应的起始材料。逆转录是一个简单的流程,包括在37oC条件下进行1个小时的孵育反应及在95oC条件下的简单孵育后进行的灭活反应。

应用

miScript II RT Kit作为miScript PCR System的一部分,用于:

  • 成熟miRNA定量检测和谱分析
  • 同时检测miRNA和mRNA
  • 同时检测成熟miRNA和miRNA前体
  • 检测snoRNA和其他非编码RNA

产品详细信息

miScript II RT Kit (50)

218161

使用miScript PCR System,对包含miRNA的总RNA进行逆转录

  • 灵敏和特异性的检测miRNA
  • 利用单一cDNA定量检测多种miRNA
  • 利用同一cDNA定量检测miRNA和mRNA
  • 利用同一cDNA定量检测成熟miRNA和miRNA前体
  • 专有技术合成RNA,评估逆转录效率

miScript II RT Kit是miScript PCR System的重要组成部分,用于miRNA定量检测。配合miScript SYBR Green PCR Kit和miScript PCRarrays(miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays)或所需的检测(用于miRNA或其他非编码RNA的miScript Primer Assays、用于miRNA前体的miScript Precursor Assays或用于mRNA的QuantiTect Primer Assays),miScript II RT Kit合成的cDNA可作为real-time PCR 的模板。

原理

miScript PCR System应用SYBR Green-based real-time PCR,能够灵敏和特异性地进行miRNA的定量和谱分析。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA及后续的real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。

miScript PCR System包含以下组分:

miScript II RT Kit,可简单、单步合成cDNA。单个cDNA合成反应可用于检测数以百计的miRNAs。双缓冲体系满足使用real-time PCR进行miRNA定量的独特要求。
miScript SYBR Green PCR Kit,包含QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix和反向引物miScript Universal Primer,配合miScript Primer Assay或miScript miRNA PCR Array进行miRNAs检测。
miScript Primer Assay或miScript Precursor Assay,前者为miRNA特异性正向引物,用于检测成熟miRNAs。后者包含正向和反向引物,靶向作用于miRNA前体的颈环序列。该产品使用miRBase中的最新序列信息设计。
miScript miRNA PCR Array,miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays被预先设定,单次使用的PCR孔板/孔盘可快速分析成熟miRNAs。
miScript miRNA PCR Array data analysis tool,免费的基于网络的工具,简化了用于miScript miRNA PCR Arrays相对定量的ΔΔCT方法。

miScript II RT Kit双缓冲体系

miScript II RT Kit包含miScript Reverse Transcriptase Mix、10x miScript Nucleics Mix、5x miScript HiSpec Buffer和5x miScript HiFlex Buffer。miScript Reverse Transcriptase Mix是一种经优化的poly(A)聚合酶和逆转录酶混合物。miScript Nucleics Mix包含dNTPs、rATP、oligo-dT引物和内部合成RNA对照(miRNA逆转录对照[miRTC]),可评估使用miScript miRNA PCR Arrays进行谱分析实验的逆转录性能(获取更多信息,请参考miScript miRNA PCR Array Handbook)。

miScript II RT Kit提供两种缓冲液:miScript HiSpec Buffer和miScript HiFlex Buffer,满足使用real-time PCR进行miRNA定量研究的特别要求(参见miScript II RT Kit buffers)。 miScript HiSpec Buffer配合miScript miRNA PCR Arrays和miScript Primer Assays进行成熟miRNA谱分析和定量实验时,提供理想的结果。miScript HiFlex Buffer适合于低通量miRNA定量实验,从同一样本进行如miRNA、mRNA和前体miRNA等不同种类的RNA的定量实验除外。

miScript HiSpec Buffer进行逆转录实验

使用miScript HiSpec Buffer进行逆转录反应,确保成熟miRNAs的选择性转化,miScript PCR Controls靶向转至cDNA。使用oligo-dT引物,成熟miRNAs通过poly(A)聚合酶加尾后,被逆转录至cDNA(参见Selective conversion of mature miRNAs into cDNA in miScript HiSpec Buffer)。 加尾和逆转录在同一试管内同时进行。oligo-dT引物有一个3’退化锚点和一个在5’端的通用标签序列,可在real-time PCR步骤扩增成熟miRNA。miScript Primer Assays配合miScript SYBR Green PCR Kit,确保通过real-time PCR灵敏、特异性的定量miRNA。加尾和通用标签保证miScript Primer Assays不会检测到基因组DNA。

miScript HiFlex Buffer进行逆转录实验

使用miScript HiFlex Buffer进行逆转录反应,可使所有种类的RNA转化至cDNA(参见Simultaneous conversion of all RNA species into cDNA in miScript HiFlex Buffer)。 使用oligo-dT引物,成熟miRNAs通过poly(A) 聚合酶加尾后,被逆转录至cDNA。加尾和逆转录在同一试管内同时进行。oligo-dT引物有一个3’退化锚点和一个在5’端的通用标签序列,可在 real-time PCR步骤扩增成熟miRNA。miScript Primer Assays配合miScript SYBR Green PCR Kit,确保通过real-time PCR定量miRNA。加尾和通用标签确保miScript Primer Assays不会检测到基因组DNA。其它种类RNA(包括miRNA前体、其它非编码RNA和mRNA)使用oligo-dT和随机引物转化至 cDNA。配合miScript SYBR Green PCR Kit,使用合适的检测进行real-time PCR的RNAs检测(如用于非编码RNA检测的miScript Primer Assays 、用于miRNA前体检测的miScript Precursor Assays和用于mRNA检测的QuantiTect Primer Assays)。

操作流程
逆转录反应操作简单。包含miRNA的总RNA作为逆转录反应的起始材料。逆转录是一个简单的流程,包括在37oC条件下进行1个小时的孵育反应及在95oC条件下的简单孵育后进行的灭活反应。

应用

miScript II RT Kit作为miScript PCR System的一部分,用于:

  • 成熟miRNA定量检测和谱分析
  • 同时检测miRNA和mRNA
  • 同时检测成熟miRNA和miRNA前体
  • 检测snoRNA和其他非编码RNA

miScript Microfluidics PCR Kit (5) 货号:331431

miScript Microfluidics PCR Kit (5) 货号:331431

miScript Microfluidics PCR Kit (5)

货  号:331431

产品规格:5

原  产  地:德国

参考价格:3580 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

miScript Microfluidics PCR Kit (5)

331431

适用于利用Fluidigm BioMark System进行miRNA的real-time PCR分析

  • 经过精心设计,可与Fluidigm Biomark System结合使用
  • 适用于高通量miRNA表达谱分析的突破性技术
  • 无偏差、可重复的结果
  • 可靠的步骤
  • 完全整合至miScript PCR System微流体学工作流程

使用miScript Microfluidics PreAMP Kit对样本进行预扩增,在Fluidigm BioMark System上使用miScript Microfluidics PCR Kit进行miRNA定量。适用于微流体学的miScript PCR System采用了突破性的技术,在Fluidigm BioMark System上,只需10 ng总RNA即可实现准确且全方位的miRNA表达分析。在一次反应中对多达400种miRNA特异性的cDNA靶点进行多重PCR预扩增,每个靶点可实 现1000–4000倍的扩增。预扩增大大降低了分析样本的要求。一次1 ng cDNA合成反应可用作至多10次预扩增反应的模板

原理
适用于微流体学的miScript PCR系列产品使研究人员能够在Fluidigm BioMark System上使用极少量的起始RNA进行miRNA谱分析实验。使用Fluidigm BioMark System,可在一块芯片上完成至多9216(96 x 96)或2304(48 x 48)次反应的高通量实验。适用于微流体学的miScript PCR系列产品可与96.96或48.48 Dynamic Array IFC兼容。利用该突破性技术,只需10 ng总RNA即可实现准确且全方位的表达分析。一次10 ng cDNA合成反应可用作至多10次预扩增反应的模板。miScript Microfluidics PreAMP Kit可在一次反应中对多达400种miRNA特异性的cDNA靶点进行多重PCR预扩增,每个靶点能实现1000–4000倍的扩增。预扩增的样本随后 可用作miScript Microfluidics PCR Kit的miRNA谱分析模板。

操作流程
在Fluidigm BioMark System上进行miRNA谱分析需要进行下列3个步骤:

  • 使用miScript II RT Kit进行逆转录
  • 使用miScript Microfluidics PreAMP Kit和miScript PreAMP Primer Mix进行预扩增
  • 使用miScript miRNA PCR Array或miScript Primer Assay和miScript Microfluidics PCR Kit进行Real-time PCR
逆转录

miScript II RT Kit中包含两种缓冲液:5x miScript HiSpec Buffer和5x miScript HiFlex Buffer。miScript HiSpec Buffer可简化成熟miRNA至cDNA的选择性转化。miScript HiSpec Buffer是制备用于后续预扩增(使用miScript Microfluidics PreAMP Kit)的cDNA的唯一缓冲液。在使用miScript Microfluidics PreAMP Kit进行预扩增之前,切勿使用miScript HiFlex Buffer。

预扩增

使用miScript Microfluidics PreAMP Kit及相应的miScript PreAMP Primer Mix进行预扩增,可实现miRNA靶点的无偏差扩增。反应包括一个重要的副反应削弱步骤,使real-time PCR中潜在的非特异性反应最小化。对于每种miScript miRNA PCR Array,都有经过确认的专用miScript PreAMP Primer Mix,其中包括可以对芯片靶向的miRNA进行选择性预扩增的引物。

使用miScript Primer Assay进行real-time PCR时,必须将单独的miScript Primer Assay混合,制备miScript PreAMP Primer Mix,进行预扩增。

利用real-time PCR进行miRNA谱分析

预扩增的cDNA可以在使用成熟miRNA特异性的正向引物(包括在miScript miRNA PCR Array中或者作为单独的miScript Primer Assay提供)和miScript Microfluidics PCR Kit进行的real-time PCR分析中用作模板,miScript Microfluidics PCR Kit中包含miScript Microfluidics Universal Primer(反向引物)和Microfluidics qPCR Master Mix(已经过优化,适用于Fluidigm BioMark System,包含可用于检测的EvaGreen染料和ROX参比荧光染料)。miScript miRNA PCR Array(Format M)适用于96.96 Dynamic Array IFC。此项领先的miRNA表达谱分析技术采用了预先干燥的miRNA特异性的正向引物,引物浓度适合在Fluidigm BioMark System上使用。

应用
在Fluidigm BioMark System上使用miScript Microfluidics PCR Kit可实现高通量miRNA表达谱分析,适用于:

  • 高通量、成熟miRNA定量和谱分析
  • 血清或血浆中的生物标记物发现

产品详细信息

miScript Microfluidics PCR Kit (5)

331431

适用于利用Fluidigm BioMark System进行miRNA的real-time PCR分析

  • 经过精心设计,可与Fluidigm Biomark System结合使用
  • 适用于高通量miRNA表达谱分析的突破性技术
  • 无偏差、可重复的结果
  • 可靠的步骤
  • 完全整合至miScript PCR System微流体学工作流程

使用miScript Microfluidics PreAMP Kit对样本进行预扩增,在Fluidigm BioMark System上使用miScript Microfluidics PCR Kit进行miRNA定量。适用于微流体学的miScript PCR System采用了突破性的技术,在Fluidigm BioMark System上,只需10 ng总RNA即可实现准确且全方位的miRNA表达分析。在一次反应中对多达400种miRNA特异性的cDNA靶点进行多重PCR预扩增,每个靶点可实 现1000–4000倍的扩增。预扩增大大降低了分析样本的要求。一次1 ng cDNA合成反应可用作至多10次预扩增反应的模板

原理
适用于微流体学的miScript PCR系列产品使研究人员能够在Fluidigm BioMark System上使用极少量的起始RNA进行miRNA谱分析实验。使用Fluidigm BioMark System,可在一块芯片上完成至多9216(96 x 96)或2304(48 x 48)次反应的高通量实验。适用于微流体学的miScript PCR系列产品可与96.96或48.48 Dynamic Array IFC兼容。利用该突破性技术,只需10 ng总RNA即可实现准确且全方位的表达分析。一次10 ng cDNA合成反应可用作至多10次预扩增反应的模板。miScript Microfluidics PreAMP Kit可在一次反应中对多达400种miRNA特异性的cDNA靶点进行多重PCR预扩增,每个靶点能实现1000–4000倍的扩增。预扩增的样本随后 可用作miScript Microfluidics PCR Kit的miRNA谱分析模板。

操作流程
在Fluidigm BioMark System上进行miRNA谱分析需要进行下列3个步骤:

  • 使用miScript II RT Kit进行逆转录
  • 使用miScript Microfluidics PreAMP Kit和miScript PreAMP Primer Mix进行预扩增
  • 使用miScript miRNA PCR Array或miScript Primer Assay和miScript Microfluidics PCR Kit进行Real-time PCR
逆转录

miScript II RT Kit中包含两种缓冲液:5x miScript HiSpec Buffer和5x miScript HiFlex Buffer。miScript HiSpec Buffer可简化成熟miRNA至cDNA的选择性转化。miScript HiSpec Buffer是制备用于后续预扩增(使用miScript Microfluidics PreAMP Kit)的cDNA的唯一缓冲液。在使用miScript Microfluidics PreAMP Kit进行预扩增之前,切勿使用miScript HiFlex Buffer。

预扩增

使用miScript Microfluidics PreAMP Kit及相应的miScript PreAMP Primer Mix进行预扩增,可实现miRNA靶点的无偏差扩增。反应包括一个重要的副反应削弱步骤,使real-time PCR中潜在的非特异性反应最小化。对于每种miScript miRNA PCR Array,都有经过确认的专用miScript PreAMP Primer Mix,其中包括可以对芯片靶向的miRNA进行选择性预扩增的引物。

使用miScript Primer Assay进行real-time PCR时,必须将单独的miScript Primer Assay混合,制备miScript PreAMP Primer Mix,进行预扩增。

利用real-time PCR进行miRNA谱分析

预扩增的cDNA可以在使用成熟miRNA特异性的正向引物(包括在miScript miRNA PCR Array中或者作为单独的miScript Primer Assay提供)和miScript Microfluidics PCR Kit进行的real-time PCR分析中用作模板,miScript Microfluidics PCR Kit中包含miScript Microfluidics Universal Primer(反向引物)和Microfluidics qPCR Master Mix(已经过优化,适用于Fluidigm BioMark System,包含可用于检测的EvaGreen染料和ROX参比荧光染料)。miScript miRNA PCR Array(Format M)适用于96.96 Dynamic Array IFC。此项领先的miRNA表达谱分析技术采用了预先干燥的miRNA特异性的正向引物,引物浓度适合在Fluidigm BioMark System上使用。

应用
在Fluidigm BioMark System上使用miScript Microfluidics PCR Kit可实现高通量miRNA表达谱分析,适用于:

  • 高通量、成熟miRNA定量和谱分析
  • 血清或血浆中的生物标记物发现

miScript PreAMP PCR Kit (12) 货号:331451

miScript PreAMP PCR Kit (12) 货号:331451

miScript PreAMP PCR Kit (12)

货  号:331451

产品规格:12

原  产  地:德国

参考价格:2810 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

miScript PreAMP PCR Kit (12)

331451

Real-time PCR分析miRNA之前,预扩增从含少量RNA的样本中获得的cDNA

  • 有限的RNA进行miRNA表达分析的突破技术
  • 无偏差、可重复性结果
  • 可靠的工作流程
  • 完全整合入miScript PCR System工作流程

miScript PreAMP PCR Kit能够预扩增含少量RNA的起始样本,用于miScript PCR System miRNA的定量。miScript PreAMP PCR Kit使用多功能的、基于PCR的预扩增技术,在一个反应中预扩增400个miRNA特异性cDNA靶点。miScript PreAMP PCR Kit配合miScript PreAMP Primer Mixes,能够准确而全面对10 ng总RNA进行表达分析。10 ng的合成cDNA可以作为10个预扩增反应的模板。这样就提供了足够的模板用于多种Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays或多种重复的miRNome miScript miRNA PCR Array,取决于使用的miScript PreAMP Primer Mix。

原理

miScript PCR System配合SYBR® Green real-time PCR能够灵敏、特异性的进行miRNA定量和分析。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA和后续的real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。miScript PreAMP PCR Kit是miScript PCR System的一部分,使得研究者能够使用非常有限量的起始RNA进行miRNA分析实验(参见Janas, M.M. et al. (2012) Reduced Expression of Ribosomal Proteins Relieves MicroRNA-Mediated Repression. Molecular Cell 46, 171.)。这对RNA含量较少的样本是非常必要的,如体液、福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本以及细胞量较少的样本,如激光捕获显微切割(LCM) 样本、流式分选细胞、循环肿瘤细胞和细针穿刺活检样本额。小样本中获得的少量RNA通常不足够进行可靠的miRNA分析实验,即使使用如real- time RT-PCR等灵敏的技术。

miScript PreAMP PCR Kit配合miScript PreAMP Primer Mixes能够对10 ng总RNA进行准确全面地表达分析,是一项重大的技术突破。10 ng的合成cDNA可以作为10个预扩增反应的模板。这样就提供了足够的模板用于多种Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays或多种重复的miRNome miScript miRNA PCR Array,取决于使用的miScript PreAMP Primer Mix。miScript PreAMP PCR Kit使用多功能的、基于PCR的预扩增技术,在一个反应中预扩增400个miRNA特异性cDNA靶点。一般情况下,不论是96-plex或384- plex反应都能扩增2000–4000倍。

操作流程

少量RNA样本获得miRNA表达谱需要3个步骤:使用miScript II RT Kit进行逆转录,使用miScript PreAMP PCR Kit和miScript PreAMP Primer Mix进行预扩增,以及使用相应的miScript miRNA PCR Array和miScript SYBR Green PCR Kit进行real-time PCR。将miScript PreAMP PCR Kit和miScript PreAMP Primer Mix的预扩增整合入miScript PCR System miRNA表达谱的工作流程,确保了实验方案的可靠性和结果的可靠性和可重复性。

miScript PreAMP Primer Mixes适用于所有miScript miRNA PCR Arrays。也可使用miScript PreAMP PCR Kit配合25个miScript Primer Assays混合液进行预扩增。

预扩增质控

miScript PreAMP PCR Kit包括4个miScript Primer Assays用于预扩增质控实验,用来检验预扩增的cDNA。下表列出了质控和它们的作用。如需获得更多的详细信息,请参考miScript PreAMP Handbook

质控 作用
miR-16 miScript Primer Assay 确定预扩增cDNA的优化稀释因子,如果不知道模板的起始量
SNORD95 miScript Primer Assay 使用相对定量∆∆CT法将组织和细胞样本的数据标准
确定预扩增cDNA的优化稀释因子,如果不知道模板的起始量,且无miR-16
C. elegans miR-39 miScript Primer Assay 测量miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control(如果纯化过程中加入),用于确定血清和血浆样本的回收率
miRTC miScript Primer Assay 评估逆转录效率

应用

miScript PreAMP PCR Kit作为miScript PCR System的一部分,用于:

  • 成熟miRNA的定量和谱分析
  • 从血清或血浆中发现生物标记物

产品详细信息

miScript PreAMP PCR Kit (12)

331451

Real-time PCR分析miRNA之前,预扩增从含少量RNA的样本中获得的cDNA

  • 有限的RNA进行miRNA表达分析的突破技术
  • 无偏差、可重复性结果
  • 可靠的工作流程
  • 完全整合入miScript PCR System工作流程

miScript PreAMP PCR Kit能够预扩增含少量RNA的起始样本,用于miScript PCR System miRNA的定量。miScript PreAMP PCR Kit使用多功能的、基于PCR的预扩增技术,在一个反应中预扩增400个miRNA特异性cDNA靶点。miScript PreAMP PCR Kit配合miScript PreAMP Primer Mixes,能够准确而全面对10 ng总RNA进行表达分析。10 ng的合成cDNA可以作为10个预扩增反应的模板。这样就提供了足够的模板用于多种Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays或多种重复的miRNome miScript miRNA PCR Array,取决于使用的miScript PreAMP Primer Mix。

原理

miScript PCR System配合SYBR® Green real-time PCR能够灵敏、特异性的进行miRNA定量和分析。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA和后续的real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。miScript PreAMP PCR Kit是miScript PCR System的一部分,使得研究者能够使用非常有限量的起始RNA进行miRNA分析实验(参见Janas, M.M. et al. (2012) Reduced Expression of Ribosomal Proteins Relieves MicroRNA-Mediated Repression. Molecular Cell 46, 171.)。这对RNA含量较少的样本是非常必要的,如体液、福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本以及细胞量较少的样本,如激光捕获显微切割(LCM) 样本、流式分选细胞、循环肿瘤细胞和细针穿刺活检样本额。小样本中获得的少量RNA通常不足够进行可靠的miRNA分析实验,即使使用如real- time RT-PCR等灵敏的技术。

miScript PreAMP PCR Kit配合miScript PreAMP Primer Mixes能够对10 ng总RNA进行准确全面地表达分析,是一项重大的技术突破。10 ng的合成cDNA可以作为10个预扩增反应的模板。这样就提供了足够的模板用于多种Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays或多种重复的miRNome miScript miRNA PCR Array,取决于使用的miScript PreAMP Primer Mix。miScript PreAMP PCR Kit使用多功能的、基于PCR的预扩增技术,在一个反应中预扩增400个miRNA特异性cDNA靶点。一般情况下,不论是96-plex或384- plex反应都能扩增2000–4000倍。

操作流程

少量RNA样本获得miRNA表达谱需要3个步骤:使用miScript II RT Kit进行逆转录,使用miScript PreAMP PCR Kit和miScript PreAMP Primer Mix进行预扩增,以及使用相应的miScript miRNA PCR Array和miScript SYBR Green PCR Kit进行real-time PCR。将miScript PreAMP PCR Kit和miScript PreAMP Primer Mix的预扩增整合入miScript PCR System miRNA表达谱的工作流程,确保了实验方案的可靠性和结果的可靠性和可重复性。

miScript PreAMP Primer Mixes适用于所有miScript miRNA PCR Arrays。也可使用miScript PreAMP PCR Kit配合25个miScript Primer Assays混合液进行预扩增。

预扩增质控

miScript PreAMP PCR Kit包括4个miScript Primer Assays用于预扩增质控实验,用来检验预扩增的cDNA。下表列出了质控和它们的作用。如需获得更多的详细信息,请参考miScript PreAMP Handbook

质控 作用
miR-16 miScript Primer Assay 确定预扩增cDNA的优化稀释因子,如果不知道模板的起始量
SNORD95 miScript Primer Assay 使用相对定量∆∆CT法将组织和细胞样本的数据标准
确定预扩增cDNA的优化稀释因子,如果不知道模板的起始量,且无miR-16
C. elegans miR-39 miScript Primer Assay 测量miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control(如果纯化过程中加入),用于确定血清和血浆样本的回收率
miRTC miScript Primer Assay 评估逆转录效率

应用

miScript PreAMP PCR Kit作为miScript PCR System的一部分,用于:

  • 成熟miRNA的定量和谱分析
  • 从血清或血浆中发现生物标记物