QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit (30) 货号:206151

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit (30) 货号:206151

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit (30)

货  号:206151

产品规格:30

原  产  地:德国

参考价格:1050 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit (30)

206151

用于成功的进行多重PCR反应

  • 成功的进行多重PCR反应,适用于高要求应用
  • 稳定、可靠的结果
  • 快速建立多重PCR反应体系,无需优化
  • 反应时间缩短,更加便利
QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit专为便利、灵敏的多重PCR设计,无需优化。该试剂盒基于专有的多重PCR技术,能够在首次尝试即获得成功的结果,且比以往更快更便利。该试剂盒提 供便利的预混液。预混液独特的成分确保了反应的高特异性和高灵敏度。该预混液包含新型的缓冲液,专为多重PCR研发。该试剂盒还提供新型的辅助剂Q- Solution,有助于扩增难以扩增的片段,如富含GC的区域或具复杂二级结构的模板。该试剂盒还提供CoralLoad Dye,确保DNA迁移的操作便利且可视。

原理

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit基于QIAGEN专有的多重PCR技术,含有即用型混合液。该试剂盒所有的成分专为提供最易操作和最大速度研发,提供一致可靠的结果(参见下表)。Multiplex PCR Master Mix包含优化的HotStarTaq Plus DNA Polymerase和MgCl2浓度,以及dNTP和新型的PCR缓冲液。

多重PCR成功的关键因素,用于各种应用的一致可靠的结果

Multiplex PCR为研究者节省时间和成本用于进行大量的PCR反应,广泛应用于基因分型以及在研究、法医和分子检测实验室的DNA或cDNA检测应用。应用范围包括 分型和转基因生物和病原体的分析、微卫星的扩增分析、检测SNP突变区域,以及宏基因组学研究。然而,多重PCR技术要求严格。PCR优化是多重PCR成 功与否的关键因素。多重PCR中不同引物对不同杂交动力学可能导致如下问题,如扩增偏向性。能高效率结合的引物,更多地利用扩增反应元件,从而降低了其他 PCR产物的产量。由于更大的引物量,因此存在更大的形成引物二聚体和非特异性启动的风险。不解决这些风险导致低灵敏度、非特异性扩增和选择靶位的偏向性 扩增,因此得到不一致的不令人满意的结果。共格这些瓶颈需要繁琐耗时的优化步骤,导致成本的增加。QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit消除了这些风险,在首次尝试时就运行顺利。Multiplex PCR Master Mix独特的组成确保了高特异性和灵敏度的扩增反应,甚至是难扩增的靶位。该试剂盒能快速成功地建立所有多重PCR检测,有效的节省时间和成本(参见Successful multiplex PCR without the need for optimization)。

HotStarTaq Plus DNA Polymerase

HotStarTaq Plus DNA PolymeraseTaq DNA聚合酶的优化形式,在室温下无聚合酶活性。这能防止在PCR设置和PCR初始循环过程中,低温下非特异性退货引物的延伸和引物二聚体的形成。无需优 化反应条件。在室温下可方便设置多重检测。HotStarTaq DNA Polymerase在95°C下孵育5分钟激活,可整合入现有的各种热循环程序中。

多重PCR缓冲液

这特殊的缓冲液包含优化的混合物由K+和NH4+以及独特的PCR辅助剂、MP因子组成可增加模板引物的局部浓度(参见Stable and efficient annealing)。将非特异性退火最小化并成功地平行扩增所有靶位,甚至只有非常少量的模板。配合K+和其他阳离子、MP因子稳定特异性结合的引物,并能够用HotStarTaq Plus DNA Polymerase进行高效的引物延伸。通过在每个PCR循环中高比率的特异性-非特异性引物结合,该新型的缓冲液维持每个PCR循环的特异性扩增。由于KCl和(NH4)2SO4独特的平衡结合,相比传统的PCR缓冲液,该缓冲液能在更广泛的退火温度和Mg2+浓度下,提供严格的引物退火条件。通过改变退火温度或Mg2+浓度可优化PCR,因此通常将优化过程最小化或无需要优化。

该试剂盒包含独特的辅助剂Q-Solution,促进难扩增的靶位扩增如富含GC的区域或具有复杂二级结构的模板。该试剂盒还含有高度灵活的CoralLoad Dye,通过提高移液器的可视性和后续的凝胶上样以及DNA迁移的可视性,来进一步提高操作的方便性(参见Easy PCR setup and convenient DNA visualization)。

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit的优点
试剂盒组分 优点
HotStarTaq Plus DNA Polymerase 高特异性和灵敏度扩增
室温设置
5分钟激活时间
Multiplex PCR Plus Buffer with Factor MP 平行扩增所有靶位
无需优化PCR参数
单一的用于所有多重检测的实验方案
快速的操作流程
CoralLoad Dye 移液过程中简单的可视化
可即可凝胶上样
DNA迁移的可视化
Q-Solution 扩增困难靶位

操作流程

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit能够在首次尝试就可成功进行多重PCR。

简单快速的下游分析

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit使用多种方法得到的多重PCR产物的下游分析简单快速。无论分析是否使用琼脂糖凝胶电泳,毛细管电泳或是否使用QIAxcel Advanced System,所有阳离子可方便的可视化,单独的片段也可有效区别。

便利的试剂盒规格

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit提供更方便的即用型预优化混合液。使用混合物节省时间、简化反应设置操作,并通过消除众多移液失误和污染的可能性来增加可靠性,将移液步骤最小化并 去除繁琐的计算。只需将引物和模板加入来制备最终扩增混合物。混合液可在2–8°C下储存,可更快速的设置多重PCR检测。可在室温下设置反应,操作简 便,易于使用。HotStarTaq Plus DNA Polymerase在95°C经5分钟孵育激活,可整合入现有的热循环程序中。试剂盒中包含的CoralLoad Dye便于使用,提高PCR设置中移液的可视化和凝胶上DNA迁移的可视化。

应用
QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit能成功应用于多种应用,从转基因生物分型、病原体检测到癌症研究、宏基因组学和基因表达分析。

产品详细信息

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit (30)

206151

用于成功的进行多重PCR反应

  • 成功的进行多重PCR反应,适用于高要求应用
  • 稳定、可靠的结果
  • 快速建立多重PCR反应体系,无需优化
  • 反应时间缩短,更加便利
QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit专为便利、灵敏的多重PCR设计,无需优化。该试剂盒基于专有的多重PCR技术,能够在首次尝试即获得成功的结果,且比以往更快更便利。该试剂盒提 供便利的预混液。预混液独特的成分确保了反应的高特异性和高灵敏度。该预混液包含新型的缓冲液,专为多重PCR研发。该试剂盒还提供新型的辅助剂Q- Solution,有助于扩增难以扩增的片段,如富含GC的区域或具复杂二级结构的模板。该试剂盒还提供CoralLoad Dye,确保DNA迁移的操作便利且可视。

原理

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit基于QIAGEN专有的多重PCR技术,含有即用型混合液。该试剂盒所有的成分专为提供最易操作和最大速度研发,提供一致可靠的结果(参见下表)。Multiplex PCR Master Mix包含优化的HotStarTaq Plus DNA Polymerase和MgCl2浓度,以及dNTP和新型的PCR缓冲液。

多重PCR成功的关键因素,用于各种应用的一致可靠的结果

Multiplex PCR为研究者节省时间和成本用于进行大量的PCR反应,广泛应用于基因分型以及在研究、法医和分子检测实验室的DNA或cDNA检测应用。应用范围包括 分型和转基因生物和病原体的分析、微卫星的扩增分析、检测SNP突变区域,以及宏基因组学研究。然而,多重PCR技术要求严格。PCR优化是多重PCR成 功与否的关键因素。多重PCR中不同引物对不同杂交动力学可能导致如下问题,如扩增偏向性。能高效率结合的引物,更多地利用扩增反应元件,从而降低了其他 PCR产物的产量。由于更大的引物量,因此存在更大的形成引物二聚体和非特异性启动的风险。不解决这些风险导致低灵敏度、非特异性扩增和选择靶位的偏向性 扩增,因此得到不一致的不令人满意的结果。共格这些瓶颈需要繁琐耗时的优化步骤,导致成本的增加。QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit消除了这些风险,在首次尝试时就运行顺利。Multiplex PCR Master Mix独特的组成确保了高特异性和灵敏度的扩增反应,甚至是难扩增的靶位。该试剂盒能快速成功地建立所有多重PCR检测,有效的节省时间和成本(参见Successful multiplex PCR without the need for optimization)。

HotStarTaq Plus DNA Polymerase

HotStarTaq Plus DNA PolymeraseTaq DNA聚合酶的优化形式,在室温下无聚合酶活性。这能防止在PCR设置和PCR初始循环过程中,低温下非特异性退货引物的延伸和引物二聚体的形成。无需优 化反应条件。在室温下可方便设置多重检测。HotStarTaq DNA Polymerase在95°C下孵育5分钟激活,可整合入现有的各种热循环程序中。

多重PCR缓冲液

这特殊的缓冲液包含优化的混合物由K+和NH4+以及独特的PCR辅助剂、MP因子组成可增加模板引物的局部浓度(参见Stable and efficient annealing)。将非特异性退火最小化并成功地平行扩增所有靶位,甚至只有非常少量的模板。配合K+和其他阳离子、MP因子稳定特异性结合的引物,并能够用HotStarTaq Plus DNA Polymerase进行高效的引物延伸。通过在每个PCR循环中高比率的特异性-非特异性引物结合,该新型的缓冲液维持每个PCR循环的特异性扩增。由于KCl和(NH4)2SO4独特的平衡结合,相比传统的PCR缓冲液,该缓冲液能在更广泛的退火温度和Mg2+浓度下,提供严格的引物退火条件。通过改变退火温度或Mg2+浓度可优化PCR,因此通常将优化过程最小化或无需要优化。

该试剂盒包含独特的辅助剂Q-Solution,促进难扩增的靶位扩增如富含GC的区域或具有复杂二级结构的模板。该试剂盒还含有高度灵活的CoralLoad Dye,通过提高移液器的可视性和后续的凝胶上样以及DNA迁移的可视性,来进一步提高操作的方便性(参见Easy PCR setup and convenient DNA visualization)。

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit的优点
试剂盒组分 优点
HotStarTaq Plus DNA Polymerase 高特异性和灵敏度扩增
室温设置
5分钟激活时间
Multiplex PCR Plus Buffer with Factor MP 平行扩增所有靶位
无需优化PCR参数
单一的用于所有多重检测的实验方案
快速的操作流程
CoralLoad Dye 移液过程中简单的可视化
可即可凝胶上样
DNA迁移的可视化
Q-Solution 扩增困难靶位

操作流程

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit能够在首次尝试就可成功进行多重PCR。

简单快速的下游分析

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit使用多种方法得到的多重PCR产物的下游分析简单快速。无论分析是否使用琼脂糖凝胶电泳,毛细管电泳或是否使用QIAxcel Advanced System,所有阳离子可方便的可视化,单独的片段也可有效区别。

便利的试剂盒规格

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit提供更方便的即用型预优化混合液。使用混合物节省时间、简化反应设置操作,并通过消除众多移液失误和污染的可能性来增加可靠性,将移液步骤最小化并 去除繁琐的计算。只需将引物和模板加入来制备最终扩增混合物。混合液可在2–8°C下储存,可更快速的设置多重PCR检测。可在室温下设置反应,操作简 便,易于使用。HotStarTaq Plus DNA Polymerase在95°C经5分钟孵育激活,可整合入现有的热循环程序中。试剂盒中包含的CoralLoad Dye便于使用,提高PCR设置中移液的可视化和凝胶上DNA迁移的可视化。

应用
QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit能成功应用于多种应用,从转基因生物分型、病原体检测到癌症研究、宏基因组学和基因表达分析。

QIAGEN Multiplex PCR Kit (100) 货号:206143

QIAGEN Multiplex PCR Kit (100) 货号:206143

QIAGEN Multiplex PCR Kit (100)

货  号:206143

产品规格:100

原  产  地:德国

参考价格:3490 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

QIAGEN Multiplex PCR Kit (100)

206143

用于高特异性和灵敏度的多重PCR,无需优化

  • 无需优化步骤
  • 高特异性和高灵敏度,热启动
  • 高度适合用于各种类型的多重PCR应用
  • 使用简单,经济实惠

QIAGEN Multiplex PCR Kit提供方便的即用型预混液。QIAGEN Multiplex PCR Master Mix包含HotStarTaq DNA Polymerase和含有新型合成因子MP的独特PCR缓冲液。配合优化的盐浓度,MP因子可以促进引物与模板的特异性结合,使反应体系中所有的引物都 能有效延伸,无需额外优化。该试剂盒还包含新型的辅助剂Q-Solution,有助于实现“困难”模板(比如,GC含量高的模板)的高效扩增。

原理

QIAGEN Multiplex PCR Kit是首个专为多重PCR研发的试剂盒,有即用型混合液规格。QIAGEN Multiplex PCR Master Mix包含预优化浓度的HotStarTaq DNA Polymerase和MgCl2、dNTPs和新型的PCR缓冲液专为多重PCR研发。该试剂盒在首次尝试多重PCR即获得成功。由于试剂盒内独特的预优化的试剂无需优化反应条件(比如,引物浓度,Mg2+Taq DNA聚合酶)和循环参数。

HotStarTaq DNA Polymerase

HotStarTaq DNA Polymerase对 Taq DNA聚合酶进行改善,在室温下无聚合酶活性。这可以防止非特异性退火引物和在低温条件下的PCR设置和初始的PCR循环中形成引物二聚体。在95°C下,经15分钟诱导可激活HotStarTaq DNA Polymerase,可纳入各种现有的热循环程序中。

多重PCR缓冲液

这特殊的缓冲液包含优化的由K+和NH4+以及独特的PCR辅助剂、MP因子可增加模板引物的局部浓度。配合K+和其他阳离子、MP因子稳定特异性结合的引物,并能够用HotStarTaq DNA Polymerase进行高效的引物延伸(参见Stable and efficient primer annealing)。通过在每个PCR循环中高比率的特异性-非特异性引物结合,该新型的缓冲液维持每个PCR循环的特异性扩增。由于KCl和(NH4)2SO4独特的平衡结合,相比传统的PCR缓冲液,该缓冲液能在更广泛的退火温度和Mg2+浓度下,提供严格的引物退火条件。通过改变退火温度或Mg2+浓度可优化PCR,因此通常将优化过程最小化或无需要优化。

Q-Solution

Q-Solution是一种新型的PCR辅助剂,有助于扩增由DNA融化特性修改的困难模板,同时配合HotStarTaq DNA Polymerase提供。该独特的试剂可优化高度二级结构或富含GC的模板所致的效果欠佳的PCR。不同于其他常用的PCR辅助剂如DMSO,Q-Solution只用于一种工作浓度,并保证无毒和PCR纯度好。

操作流程

QIAGEN Multiplex PCR Kit含有即用型、预优化的混合液,非常方便。使用混合液节省时间、简化反应体系构建流程,并通过消除移液失误和污染,增加可靠性,减少移液步骤和繁琐的 计算。只需加入引物和模板来制备最终扩增混合液。混合液可在2–8°C储存,可快速设置多重PCR检测。该试剂盒提供的精简的实验方案确保快速简单的 PCR设置。可在室温下设置反应,简单方便,易于使用。HotStarTaq DNA Polymerase可在95°C下孵育15分钟激活,因此可整合入各种现有的热循环流程中。

应用

QIAGEN Multiplex PCR Kit高度适用于各种多重应用,包括:

  • 转基因生物的分型和分析
  • 微卫星的扩增和分析
  • 细菌和病毒的分型和检测
  • 用于SNP分析的多个DNA扩增

产品详细信息

QIAGEN Multiplex PCR Kit (100)

206143

用于高特异性和灵敏度的多重PCR,无需优化

  • 无需优化步骤
  • 高特异性和高灵敏度,热启动
  • 高度适合用于各种类型的多重PCR应用
  • 使用简单,经济实惠

QIAGEN Multiplex PCR Kit提供方便的即用型预混液。QIAGEN Multiplex PCR Master Mix包含HotStarTaq DNA Polymerase和含有新型合成因子MP的独特PCR缓冲液。配合优化的盐浓度,MP因子可以促进引物与模板的特异性结合,使反应体系中所有的引物都 能有效延伸,无需额外优化。该试剂盒还包含新型的辅助剂Q-Solution,有助于实现“困难”模板(比如,GC含量高的模板)的高效扩增。

原理

QIAGEN Multiplex PCR Kit是首个专为多重PCR研发的试剂盒,有即用型混合液规格。QIAGEN Multiplex PCR Master Mix包含预优化浓度的HotStarTaq DNA Polymerase和MgCl2、dNTPs和新型的PCR缓冲液专为多重PCR研发。该试剂盒在首次尝试多重PCR即获得成功。由于试剂盒内独特的预优化的试剂无需优化反应条件(比如,引物浓度,Mg2+Taq DNA聚合酶)和循环参数。

HotStarTaq DNA Polymerase

HotStarTaq DNA Polymerase对 Taq DNA聚合酶进行改善,在室温下无聚合酶活性。这可以防止非特异性退火引物和在低温条件下的PCR设置和初始的PCR循环中形成引物二聚体。在95°C下,经15分钟诱导可激活HotStarTaq DNA Polymerase,可纳入各种现有的热循环程序中。

多重PCR缓冲液

这特殊的缓冲液包含优化的由K+和NH4+以及独特的PCR辅助剂、MP因子可增加模板引物的局部浓度。配合K+和其他阳离子、MP因子稳定特异性结合的引物,并能够用HotStarTaq DNA Polymerase进行高效的引物延伸(参见Stable and efficient primer annealing)。通过在每个PCR循环中高比率的特异性-非特异性引物结合,该新型的缓冲液维持每个PCR循环的特异性扩增。由于KCl和(NH4)2SO4独特的平衡结合,相比传统的PCR缓冲液,该缓冲液能在更广泛的退火温度和Mg2+浓度下,提供严格的引物退火条件。通过改变退火温度或Mg2+浓度可优化PCR,因此通常将优化过程最小化或无需要优化。

Q-Solution

Q-Solution是一种新型的PCR辅助剂,有助于扩增由DNA融化特性修改的困难模板,同时配合HotStarTaq DNA Polymerase提供。该独特的试剂可优化高度二级结构或富含GC的模板所致的效果欠佳的PCR。不同于其他常用的PCR辅助剂如DMSO,Q-Solution只用于一种工作浓度,并保证无毒和PCR纯度好。

操作流程

QIAGEN Multiplex PCR Kit含有即用型、预优化的混合液,非常方便。使用混合液节省时间、简化反应体系构建流程,并通过消除移液失误和污染,增加可靠性,减少移液步骤和繁琐的 计算。只需加入引物和模板来制备最终扩增混合液。混合液可在2–8°C储存,可快速设置多重PCR检测。该试剂盒提供的精简的实验方案确保快速简单的 PCR设置。可在室温下设置反应,简单方便,易于使用。HotStarTaq DNA Polymerase可在95°C下孵育15分钟激活,因此可整合入各种现有的热循环流程中。

应用

QIAGEN Multiplex PCR Kit高度适用于各种多重应用,包括:

  • 转基因生物的分型和分析
  • 微卫星的扩增和分析
  • 细菌和病毒的分型和检测
  • 用于SNP分析的多个DNA扩增

QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit (200) 货号:204743

QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit (200) 货号:204743

QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit (200)

货  号:204743

产品规格:200

原  产  地:德国

参考价格:7830 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit (200)

204743

使用序列特异性探针进行两步法多重定量RT-PCR,用于基因表达分析

  • 无需优化的多重PCR分析
  • 单次反应分析多个目标序列
  • 灵敏地检测低至10个拷贝的目标序列
  • 可靠的定量检测目标序列和对照基因

QuantiTect Multiplex PCR Kit可通过多重两步法real-time PCR在单管中对5个cDNA进行可靠的定量检测。即用型预混液具有热启动和独特的PCR缓冲液体系,无需优化即可在各种real-time PCR仪上进行高度灵敏、可靠的多重定量PCR。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。该试剂盒有两种规格:QuantiTect Multiplex PCR Kit适用于需要ROX染料进行荧光校正的PCR仪,QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit适用于其他PCR仪。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

原理

使用QuantiTect Multiplex PCR Kit可确保两步法多重RT-PCR反应的成功(参见QIAGEN multiplex kits)。优化的预混液确保PCR产物在多重反应中的扩增效率和灵敏度与在单一反应中相同。此试剂盒可检测低至10个拷贝的靶基因。

在同一反应液中扩增对照和靶基因,可减少操作误差,提高基因定量分析的可靠性。QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有浓度平衡的K+、NH4+和独特合成的MP因子,可促使引物和探针与核酸模板稳定、高效的退火,提高PCR效率(参见Unique PCR buffer)。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase具有严谨的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,保证被污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。

QuantiTect Multiplex PCR Kit的组分
组分 特点 优势
HotStarTaq DNA Polymerase 在95ºC下15分钟即可活化 在室温下构建qPCR反应
QuantiTect Multiplex PCR Buffer 比例平衡的NH4+和K+ 特异性引物退火,确保可靠的PCR结果
Synthetic Factor MP 在同一管中对至多4个基因进行可靠的多重分析
dNTP混合液 包含dUTP,部分替代dTTP,可选用UNG处理 选用UNG处理,可消除PCR产物残留污染
ROX染料* 在Applied Biosystems或Agilent仪器上可标准化荧光信号 在需要ROX染料的循环仪上准确定量。不干扰在其他real-time循环仪上的反应。
* 如需查看预混液中是否很有ROX染料,请参见”Choosing the right QuantiTect Multiplex PCR Kit”。

操作流程

QuantiTect Multiplex PCR Kit含有即用型预混液,无需对反应液和循环条件进行优化。操作手册提供了适用于各种real-time PCR仪的实验方案,并列有推荐的染料。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)(不提供)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。

可选预混液中含或不含ROX染料的试剂盒,确保能在各种real-time PCR仪上使用(见表)。ROX浓度已优化,可通过自动数据分析对低拷贝数进行检测。

选择合适的QuantiTect Multiplex PCR Kit
ROX染料 试剂盒 兼容的循环仪
预混液中含有 QuantiTect Multiplex PCR Kit Applied Biosystems的循环仪
预混液中不含 QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit Rotor-Gene系列循环仪,Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche、Agilent和其他供应商的循环仪

我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA,可在两步法real-time RT-PCR中获得出色结果。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,并去除基因组DNA污染。

应用

QuantiTect Multiplex PCR Kit可在各种real-time PCR仪上对cDNA进行基因表达分析,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex PCR Kit。

产品详细信息

QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit (200)

204743

使用序列特异性探针进行两步法多重定量RT-PCR,用于基因表达分析

  • 无需优化的多重PCR分析
  • 单次反应分析多个目标序列
  • 灵敏地检测低至10个拷贝的目标序列
  • 可靠的定量检测目标序列和对照基因

QuantiTect Multiplex PCR Kit可通过多重两步法real-time PCR在单管中对5个cDNA进行可靠的定量检测。即用型预混液具有热启动和独特的PCR缓冲液体系,无需优化即可在各种real-time PCR仪上进行高度灵敏、可靠的多重定量PCR。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。该试剂盒有两种规格:QuantiTect Multiplex PCR Kit适用于需要ROX染料进行荧光校正的PCR仪,QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit适用于其他PCR仪。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

原理

使用QuantiTect Multiplex PCR Kit可确保两步法多重RT-PCR反应的成功(参见QIAGEN multiplex kits)。优化的预混液确保PCR产物在多重反应中的扩增效率和灵敏度与在单一反应中相同。此试剂盒可检测低至10个拷贝的靶基因。

在同一反应液中扩增对照和靶基因,可减少操作误差,提高基因定量分析的可靠性。QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有浓度平衡的K+、NH4+和独特合成的MP因子,可促使引物和探针与核酸模板稳定、高效的退火,提高PCR效率(参见Unique PCR buffer)。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase具有严谨的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,保证被污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。

QuantiTect Multiplex PCR Kit的组分
组分 特点 优势
HotStarTaq DNA Polymerase 在95ºC下15分钟即可活化 在室温下构建qPCR反应
QuantiTect Multiplex PCR Buffer 比例平衡的NH4+和K+ 特异性引物退火,确保可靠的PCR结果
Synthetic Factor MP 在同一管中对至多4个基因进行可靠的多重分析
dNTP混合液 包含dUTP,部分替代dTTP,可选用UNG处理 选用UNG处理,可消除PCR产物残留污染
ROX染料* 在Applied Biosystems或Agilent仪器上可标准化荧光信号 在需要ROX染料的循环仪上准确定量。不干扰在其他real-time循环仪上的反应。
* 如需查看预混液中是否很有ROX染料,请参见”Choosing the right QuantiTect Multiplex PCR Kit”。

操作流程

QuantiTect Multiplex PCR Kit含有即用型预混液,无需对反应液和循环条件进行优化。操作手册提供了适用于各种real-time PCR仪的实验方案,并列有推荐的染料。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)(不提供)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。

可选预混液中含或不含ROX染料的试剂盒,确保能在各种real-time PCR仪上使用(见表)。ROX浓度已优化,可通过自动数据分析对低拷贝数进行检测。

选择合适的QuantiTect Multiplex PCR Kit
ROX染料 试剂盒 兼容的循环仪
预混液中含有 QuantiTect Multiplex PCR Kit Applied Biosystems的循环仪
预混液中不含 QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit Rotor-Gene系列循环仪,Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche、Agilent和其他供应商的循环仪

我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA,可在两步法real-time RT-PCR中获得出色结果。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,并去除基因组DNA污染。

应用

QuantiTect Multiplex PCR Kit可在各种real-time PCR仪上对cDNA进行基因表达分析,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex PCR Kit。

QuantiFast Multiplex PCR Kit (80) 货号:204652

QuantiFast Multiplex PCR Kit (80) 货号:204652

QuantiFast Multiplex PCR Kit (80)

货  号:204652

产品规格:80

原  产  地:德国

参考价格:1750 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

QuantiFast Multiplex PCR Kit (80)

204652

使用序列特异性探针进行快速的多重两步法RT-PCR,适用于基因表达分析

  • 灵敏检测单管中的多个目标
  • 快速获得结果,可节省多达50%的时间
  • 无需优化,即可成功进行多重PCR
  • 准确区分起始量相近的模板

应用QuantiFast Multiplex PCR Kit可在单管内通过多重两步法real-time PCR对多至4个cDNA进行快速、可靠的定量检测。Q-Bond和优化的预混液促进快速多重real-time PCR的进行,适用于快速或标准PCR仪。即用型预混液中的热启动酶和独特的PCR缓冲液可确保在所有real-time PCR仪上进行灵敏的qPCR,无需优化。有两种规格的试剂盒:QuantiFast Multiplex PCR Kit适用于需要ROX染料进行荧光信号校准的PCR仪,QuantiFast Multiplex PCR +R Kit适用于其他所有PCR仪。为便于使用,预混液可保存在2–8°C。

原理

QuantiFast Multiplex PCR Kits可在标准或快速PCR仪上快速、灵敏的获得反应结果,无需优化(参见QIAGEN multiplex kits)。特制的快速PCR缓冲液含有新型Q-Bond成分,可明显缩短变性、退火和延伸的时间(参见Fast primer annealing)。

在同一个反应中同时扩增对照和靶基因,而非分开反应,减少了操作误差,提高了检测的可靠性。QuantiFast Multiplex PCR Buffer 含有平衡配比的K+和NH4+以及独特的MP因子,二者可促进引物、探针与核酸模板的稳定高效结合,确保高效的PCR反应(参见Unique PCR buffer)此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase要求严谨的热启动,可阻止非特异性产物的形成。

2x QuantiFast Multiplex PCR Kit的成分**也含有dNTP混合液(dATP、dCTP、dGTP和dTTP)。 ROX染料或者在预混液中,或者另外提供。

成分 特点 优势
HotStarTaq Plus DNA Polymerase 95ºC加热5分钟活化 在室温进行qPCR反应体系构建
QuantiFast Multiplex PCR Buffer 平衡的NH4+和K+离子配比 引物探针的特异性结合确保获得可靠结果
合成的MP因子 在单管中可靠的对至多4个基因进行多重分析
独特的Q-Bond添加剂 PCR运行时间缩短,更快获得结果,一天内可完成更多PCR反应
ROX染料 对Applied Biosystems和Agilent PCR仪进行荧光信号的校准 对需要ROX染料的PCR仪进行校准,不影响PCR反应结果

操作流程

QuantiFast Multiplex PCR Kit含有即用型预混液,无需优化反应及循环条件。只需将cDNA和引物探针对加入预混液中,按照操作手册进行实验,即可快速获得可靠的结果,适用于所有 real-time PCR仪。试剂盒提供两种形式:预混液中含有或不含荧光校正用的ROX染料,可用于所有PCR仪(参见下表)。由于ROX浓度经优化,即使是低拷贝数也可 通过数据自动分析进行检测。

选择合适的QuantiFast Multiplex PCR Kit

ROX染料 试剂盒 适用的PCR仪
混合在预混液中 QuantiFast Multiplex PCR Kit 除Applied Biosystems 7500外的所有Applied Biosystems仪器
单独装在管中 QuantiFast Multiplex PCR +R Kit Applied Biosystems 7500、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、QIAGEN、Roche、Agilent和其他供应商的PCR仪

为获得最佳的两步法real-time RT-PCR结果,我们建议使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。该试剂盒可在20分钟进行快速cDNA合成,并去除基因组DNA污染。

QuantiFast Probe Assays利用序列特异性水解探针检测技术,是适合全基因组的预制试剂。 随QuantiFast Multiplex PCR Kit提供,可确保在双染两步法real-time RT-PCR反应中获得可靠结果。 

应用

QuantiFast Multiplex PCR Kit可用在各种real-time PCR仪上对cDNA进行多重基因表达分析,适用仪器包括Agilent、Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf和Roche的PCR仪。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪或其他Rotor-Gene PCR仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex PCR Kit。

产品详细信息

QuantiFast Multiplex PCR Kit (80)

204652

使用序列特异性探针进行快速的多重两步法RT-PCR,适用于基因表达分析

  • 灵敏检测单管中的多个目标
  • 快速获得结果,可节省多达50%的时间
  • 无需优化,即可成功进行多重PCR
  • 准确区分起始量相近的模板

应用QuantiFast Multiplex PCR Kit可在单管内通过多重两步法real-time PCR对多至4个cDNA进行快速、可靠的定量检测。Q-Bond和优化的预混液促进快速多重real-time PCR的进行,适用于快速或标准PCR仪。即用型预混液中的热启动酶和独特的PCR缓冲液可确保在所有real-time PCR仪上进行灵敏的qPCR,无需优化。有两种规格的试剂盒:QuantiFast Multiplex PCR Kit适用于需要ROX染料进行荧光信号校准的PCR仪,QuantiFast Multiplex PCR +R Kit适用于其他所有PCR仪。为便于使用,预混液可保存在2–8°C。

原理

QuantiFast Multiplex PCR Kits可在标准或快速PCR仪上快速、灵敏的获得反应结果,无需优化(参见QIAGEN multiplex kits)。特制的快速PCR缓冲液含有新型Q-Bond成分,可明显缩短变性、退火和延伸的时间(参见Fast primer annealing)。

在同一个反应中同时扩增对照和靶基因,而非分开反应,减少了操作误差,提高了检测的可靠性。QuantiFast Multiplex PCR Buffer 含有平衡配比的K+和NH4+以及独特的MP因子,二者可促进引物、探针与核酸模板的稳定高效结合,确保高效的PCR反应(参见Unique PCR buffer)此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase要求严谨的热启动,可阻止非特异性产物的形成。

2x QuantiFast Multiplex PCR Kit的成分**也含有dNTP混合液(dATP、dCTP、dGTP和dTTP)。 ROX染料或者在预混液中,或者另外提供。

成分 特点 优势
HotStarTaq Plus DNA Polymerase 95ºC加热5分钟活化 在室温进行qPCR反应体系构建
QuantiFast Multiplex PCR Buffer 平衡的NH4+和K+离子配比 引物探针的特异性结合确保获得可靠结果
合成的MP因子 在单管中可靠的对至多4个基因进行多重分析
独特的Q-Bond添加剂 PCR运行时间缩短,更快获得结果,一天内可完成更多PCR反应
ROX染料 对Applied Biosystems和Agilent PCR仪进行荧光信号的校准 对需要ROX染料的PCR仪进行校准,不影响PCR反应结果

操作流程

QuantiFast Multiplex PCR Kit含有即用型预混液,无需优化反应及循环条件。只需将cDNA和引物探针对加入预混液中,按照操作手册进行实验,即可快速获得可靠的结果,适用于所有 real-time PCR仪。试剂盒提供两种形式:预混液中含有或不含荧光校正用的ROX染料,可用于所有PCR仪(参见下表)。由于ROX浓度经优化,即使是低拷贝数也可 通过数据自动分析进行检测。

选择合适的QuantiFast Multiplex PCR Kit

ROX染料 试剂盒 适用的PCR仪
混合在预混液中 QuantiFast Multiplex PCR Kit 除Applied Biosystems 7500外的所有Applied Biosystems仪器
单独装在管中 QuantiFast Multiplex PCR +R Kit Applied Biosystems 7500、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、QIAGEN、Roche、Agilent和其他供应商的PCR仪

为获得最佳的两步法real-time RT-PCR结果,我们建议使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。该试剂盒可在20分钟进行快速cDNA合成,并去除基因组DNA污染。

QuantiFast Probe Assays利用序列特异性水解探针检测技术,是适合全基因组的预制试剂。 随QuantiFast Multiplex PCR Kit提供,可确保在双染两步法real-time RT-PCR反应中获得可靠结果。 

应用

QuantiFast Multiplex PCR Kit可用在各种real-time PCR仪上对cDNA进行多重基因表达分析,适用仪器包括Agilent、Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf和Roche的PCR仪。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪或其他Rotor-Gene PCR仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex PCR Kit。

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit (100) 货号:206152

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit (100) 货号:206152

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit (100)

货  号:206152

产品规格:100

原  产  地:德国

参考价格:2960 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit (100)

206152

用于成功的进行多重PCR反应

  • 成功的进行多重PCR反应,适用于高要求应用
  • 稳定、可靠的结果
  • 快速建立多重PCR反应体系,无需优化
  • 反应时间缩短,更加便利
QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit专为便利、灵敏的多重PCR设计,无需优化。该试剂盒基于专有的多重PCR技术,能够在首次尝试即获得成功的结果,且比以往更快更便利。该试剂盒提 供便利的预混液。预混液独特的成分确保了反应的高特异性和高灵敏度。该预混液包含新型的缓冲液,专为多重PCR研发。该试剂盒还提供新型的辅助剂Q- Solution,有助于扩增难以扩增的片段,如富含GC的区域或具复杂二级结构的模板。该试剂盒还提供CoralLoad Dye,确保DNA迁移的操作便利且可视。

原理

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit基于QIAGEN专有的多重PCR技术,含有即用型混合液。该试剂盒所有的成分专为提供最易操作和最大速度研发,提供一致可靠的结果(参见下表)。Multiplex PCR Master Mix包含优化的HotStarTaq Plus DNA Polymerase和MgCl2浓度,以及dNTP和新型的PCR缓冲液。

多重PCR成功的关键因素,用于各种应用的一致可靠的结果

Multiplex PCR为研究者节省时间和成本用于进行大量的PCR反应,广泛应用于基因分型以及在研究、法医和分子检测实验室的DNA或cDNA检测应用。应用范围包括 分型和转基因生物和病原体的分析、微卫星的扩增分析、检测SNP突变区域,以及宏基因组学研究。然而,多重PCR技术要求严格。PCR优化是多重PCR成 功与否的关键因素。多重PCR中不同引物对不同杂交动力学可能导致如下问题,如扩增偏向性。能高效率结合的引物,更多地利用扩增反应元件,从而降低了其他 PCR产物的产量。由于更大的引物量,因此存在更大的形成引物二聚体和非特异性启动的风险。不解决这些风险导致低灵敏度、非特异性扩增和选择靶位的偏向性 扩增,因此得到不一致的不令人满意的结果。共格这些瓶颈需要繁琐耗时的优化步骤,导致成本的增加。QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit消除了这些风险,在首次尝试时就运行顺利。Multiplex PCR Master Mix独特的组成确保了高特异性和灵敏度的扩增反应,甚至是难扩增的靶位。该试剂盒能快速成功地建立所有多重PCR检测,有效的节省时间和成本(参见Successful multiplex PCR without the need for optimization)。

HotStarTaq Plus DNA Polymerase

HotStarTaq Plus DNA PolymeraseTaq DNA聚合酶的优化形式,在室温下无聚合酶活性。这能防止在PCR设置和PCR初始循环过程中,低温下非特异性退货引物的延伸和引物二聚体的形成。无需优 化反应条件。在室温下可方便设置多重检测。HotStarTaq DNA Polymerase在95°C下孵育5分钟激活,可整合入现有的各种热循环程序中。

多重PCR缓冲液

这特殊的缓冲液包含优化的混合物由K+和NH4+以及独特的PCR辅助剂、MP因子组成可增加模板引物的局部浓度(参见Stable and efficient annealing)。将非特异性退火最小化并成功地平行扩增所有靶位,甚至只有非常少量的模板。配合K+和其他阳离子、MP因子稳定特异性结合的引物,并能够用HotStarTaq Plus DNA Polymerase进行高效的引物延伸。通过在每个PCR循环中高比率的特异性-非特异性引物结合,该新型的缓冲液维持每个PCR循环的特异性扩增。由于KCl和(NH4)2SO4独特的平衡结合,相比传统的PCR缓冲液,该缓冲液能在更广泛的退火温度和Mg2+浓度下,提供严格的引物退火条件。通过改变退火温度或Mg2+浓度可优化PCR,因此通常将优化过程最小化或无需要优化。

该试剂盒包含独特的辅助剂Q-Solution,促进难扩增的靶位扩增如富含GC的区域或具有复杂二级结构的模板。该试剂盒还含有高度灵活的CoralLoad Dye,通过提高移液器的可视性和后续的凝胶上样以及DNA迁移的可视性,来进一步提高操作的方便性(参见Easy PCR setup and convenient DNA visualization)。

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit的优点
试剂盒组分 优点
HotStarTaq Plus DNA Polymerase 高特异性和灵敏度扩增
室温设置
5分钟激活时间
Multiplex PCR Plus Buffer with Factor MP 平行扩增所有靶位
无需优化PCR参数
单一的用于所有多重检测的实验方案
快速的操作流程
CoralLoad Dye 移液过程中简单的可视化
可即可凝胶上样
DNA迁移的可视化
Q-Solution 扩增困难靶位

操作流程

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit能够在首次尝试就可成功进行多重PCR。

简单快速的下游分析

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit使用多种方法得到的多重PCR产物的下游分析简单快速。无论分析是否使用琼脂糖凝胶电泳,毛细管电泳或是否使用QIAxcel Advanced System,所有阳离子可方便的可视化,单独的片段也可有效区别。

便利的试剂盒规格

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit提供更方便的即用型预优化混合液。使用混合物节省时间、简化反应设置操作,并通过消除众多移液失误和污染的可能性来增加可靠性,将移液步骤最小化并 去除繁琐的计算。只需将引物和模板加入来制备最终扩增混合物。混合液可在2–8°C下储存,可更快速的设置多重PCR检测。可在室温下设置反应,操作简 便,易于使用。HotStarTaq Plus DNA Polymerase在95°C经5分钟孵育激活,可整合入现有的热循环程序中。试剂盒中包含的CoralLoad Dye便于使用,提高PCR设置中移液的可视化和凝胶上DNA迁移的可视化。

应用
QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit能成功应用于多种应用,从转基因生物分型、病原体检测到癌症研究、宏基因组学和基因表达分析。

产品详细信息

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit (100)

206152

用于成功的进行多重PCR反应

  • 成功的进行多重PCR反应,适用于高要求应用
  • 稳定、可靠的结果
  • 快速建立多重PCR反应体系,无需优化
  • 反应时间缩短,更加便利
QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit专为便利、灵敏的多重PCR设计,无需优化。该试剂盒基于专有的多重PCR技术,能够在首次尝试即获得成功的结果,且比以往更快更便利。该试剂盒提 供便利的预混液。预混液独特的成分确保了反应的高特异性和高灵敏度。该预混液包含新型的缓冲液,专为多重PCR研发。该试剂盒还提供新型的辅助剂Q- Solution,有助于扩增难以扩增的片段,如富含GC的区域或具复杂二级结构的模板。该试剂盒还提供CoralLoad Dye,确保DNA迁移的操作便利且可视。

原理

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit基于QIAGEN专有的多重PCR技术,含有即用型混合液。该试剂盒所有的成分专为提供最易操作和最大速度研发,提供一致可靠的结果(参见下表)。Multiplex PCR Master Mix包含优化的HotStarTaq Plus DNA Polymerase和MgCl2浓度,以及dNTP和新型的PCR缓冲液。

多重PCR成功的关键因素,用于各种应用的一致可靠的结果

Multiplex PCR为研究者节省时间和成本用于进行大量的PCR反应,广泛应用于基因分型以及在研究、法医和分子检测实验室的DNA或cDNA检测应用。应用范围包括 分型和转基因生物和病原体的分析、微卫星的扩增分析、检测SNP突变区域,以及宏基因组学研究。然而,多重PCR技术要求严格。PCR优化是多重PCR成 功与否的关键因素。多重PCR中不同引物对不同杂交动力学可能导致如下问题,如扩增偏向性。能高效率结合的引物,更多地利用扩增反应元件,从而降低了其他 PCR产物的产量。由于更大的引物量,因此存在更大的形成引物二聚体和非特异性启动的风险。不解决这些风险导致低灵敏度、非特异性扩增和选择靶位的偏向性 扩增,因此得到不一致的不令人满意的结果。共格这些瓶颈需要繁琐耗时的优化步骤,导致成本的增加。QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit消除了这些风险,在首次尝试时就运行顺利。Multiplex PCR Master Mix独特的组成确保了高特异性和灵敏度的扩增反应,甚至是难扩增的靶位。该试剂盒能快速成功地建立所有多重PCR检测,有效的节省时间和成本(参见Successful multiplex PCR without the need for optimization)。

HotStarTaq Plus DNA Polymerase

HotStarTaq Plus DNA PolymeraseTaq DNA聚合酶的优化形式,在室温下无聚合酶活性。这能防止在PCR设置和PCR初始循环过程中,低温下非特异性退货引物的延伸和引物二聚体的形成。无需优 化反应条件。在室温下可方便设置多重检测。HotStarTaq DNA Polymerase在95°C下孵育5分钟激活,可整合入现有的各种热循环程序中。

多重PCR缓冲液

这特殊的缓冲液包含优化的混合物由K+和NH4+以及独特的PCR辅助剂、MP因子组成可增加模板引物的局部浓度(参见Stable and efficient annealing)。将非特异性退火最小化并成功地平行扩增所有靶位,甚至只有非常少量的模板。配合K+和其他阳离子、MP因子稳定特异性结合的引物,并能够用HotStarTaq Plus DNA Polymerase进行高效的引物延伸。通过在每个PCR循环中高比率的特异性-非特异性引物结合,该新型的缓冲液维持每个PCR循环的特异性扩增。由于KCl和(NH4)2SO4独特的平衡结合,相比传统的PCR缓冲液,该缓冲液能在更广泛的退火温度和Mg2+浓度下,提供严格的引物退火条件。通过改变退火温度或Mg2+浓度可优化PCR,因此通常将优化过程最小化或无需要优化。

该试剂盒包含独特的辅助剂Q-Solution,促进难扩增的靶位扩增如富含GC的区域或具有复杂二级结构的模板。该试剂盒还含有高度灵活的CoralLoad Dye,通过提高移液器的可视性和后续的凝胶上样以及DNA迁移的可视性,来进一步提高操作的方便性(参见Easy PCR setup and convenient DNA visualization)。

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit的优点
试剂盒组分 优点
HotStarTaq Plus DNA Polymerase 高特异性和灵敏度扩增
室温设置
5分钟激活时间
Multiplex PCR Plus Buffer with Factor MP 平行扩增所有靶位
无需优化PCR参数
单一的用于所有多重检测的实验方案
快速的操作流程
CoralLoad Dye 移液过程中简单的可视化
可即可凝胶上样
DNA迁移的可视化
Q-Solution 扩增困难靶位

操作流程

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit能够在首次尝试就可成功进行多重PCR。

简单快速的下游分析

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit使用多种方法得到的多重PCR产物的下游分析简单快速。无论分析是否使用琼脂糖凝胶电泳,毛细管电泳或是否使用QIAxcel Advanced System,所有阳离子可方便的可视化,单独的片段也可有效区别。

便利的试剂盒规格

QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit提供更方便的即用型预优化混合液。使用混合物节省时间、简化反应设置操作,并通过消除众多移液失误和污染的可能性来增加可靠性,将移液步骤最小化并 去除繁琐的计算。只需将引物和模板加入来制备最终扩增混合物。混合液可在2–8°C下储存,可更快速的设置多重PCR检测。可在室温下设置反应,操作简 便,易于使用。HotStarTaq Plus DNA Polymerase在95°C经5分钟孵育激活,可整合入现有的热循环程序中。试剂盒中包含的CoralLoad Dye便于使用,提高PCR设置中移液的可视化和凝胶上DNA迁移的可视化。

应用
QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit能成功应用于多种应用,从转基因生物分型、病原体检测到癌症研究、宏基因组学和基因表达分析。

QuantiTect Multiplex PCR Kit (200) 货号:204543

QuantiTect Multiplex PCR Kit (200) 货号:204543

QuantiTect Multiplex PCR Kit (200)

货  号:204543

产品规格:200

原  产  地:德国

参考价格:7380 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

QuantiTect Multiplex PCR Kit (200)

204543

使用序列特异性探针进行两步法多重定量RT-PCR,用于基因表达分析

  • 无需优化的多重PCR分析
  • 单次反应分析多个目标序列
  • 灵敏地检测低至10个拷贝的目标序列
  • 可靠的定量检测目标序列和对照基因

QuantiTect Multiplex PCR Kit可通过多重两步法real-time PCR在单管中对5个cDNA进行可靠的定量检测。即用型预混液具有热启动和独特的PCR缓冲液体系,无需优化即可在各种real-time PCR仪上进行高度灵敏、可靠的多重定量PCR。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。该试剂盒有两种规格:QuantiTect Multiplex PCR Kit适用于需要ROX染料进行荧光校正的PCR仪,QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit适用于其他PCR仪。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

原理

使用QuantiTect Multiplex PCR Kit可确保两步法多重RT-PCR反应的成功(参见QIAGEN multiplex kits)。优化的预混液确保PCR产物在多重反应中的扩增效率和灵敏度与在单一反应中相同。此试剂盒可检测低至10个拷贝的靶基因。

在同一反应液中扩增对照和靶基因,可减少操作误差,提高基因定量分析的可靠性。QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有浓度平衡的K+、NH4+和独特合成的MP因子,可促使引物和探针与核酸模板稳定、高效的退火,提高PCR效率(参见Unique PCR buffer)。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase具有严谨的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,保证被污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。

QuantiTect Multiplex PCR Kit的组分
组分 特点 优势
HotStarTaq DNA Polymerase 在95ºC下15分钟即可活化 在室温下构建qPCR反应
QuantiTect Multiplex PCR Buffer 比例平衡的NH4+和K+ 特异性引物退火,确保可靠的PCR结果
Synthetic Factor MP 在同一管中对至多4个基因进行可靠的多重分析
dNTP混合液 包含dUTP,部分替代dTTP,可选用UNG处理 选用UNG处理,可消除PCR产物残留污染
ROX染料* 在Applied Biosystems或Agilent仪器上可标准化荧光信号 在需要ROX染料的循环仪上准确定量。不干扰在其他real-time循环仪上的反应。
* 如需查看预混液中是否很有ROX染料,请参见”Choosing the right QuantiTect Multiplex PCR Kit”。

操作流程

QuantiTect Multiplex PCR Kit含有即用型预混液,无需对反应液和循环条件进行优化。操作手册提供了适用于各种real-time PCR仪的实验方案,并列有推荐的染料。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)(不提供)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。

可选预混液中含或不含ROX染料的试剂盒,确保能在各种real-time PCR仪上使用(见表)。ROX浓度已优化,可通过自动数据分析对低拷贝数进行检测。

选择合适的QuantiTect Multiplex PCR Kit
ROX染料 试剂盒 兼容的循环仪
预混液中含有 QuantiTect Multiplex PCR Kit Applied Biosystems的循环仪
预混液中不含 QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit Rotor-Gene系列循环仪,Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche、Agilent和其他供应商的循环仪

我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA,可在两步法real-time RT-PCR中获得出色结果。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,并去除基因组DNA污染。

应用

QuantiTect Multiplex PCR Kit可在各种real-time PCR仪上对cDNA进行基因表达分析,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex PCR Kit。

产品详细信息

QuantiTect Multiplex PCR Kit (200)

204543

使用序列特异性探针进行两步法多重定量RT-PCR,用于基因表达分析

  • 无需优化的多重PCR分析
  • 单次反应分析多个目标序列
  • 灵敏地检测低至10个拷贝的目标序列
  • 可靠的定量检测目标序列和对照基因

QuantiTect Multiplex PCR Kit可通过多重两步法real-time PCR在单管中对5个cDNA进行可靠的定量检测。即用型预混液具有热启动和独特的PCR缓冲液体系,无需优化即可在各种real-time PCR仪上进行高度灵敏、可靠的多重定量PCR。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。该试剂盒有两种规格:QuantiTect Multiplex PCR Kit适用于需要ROX染料进行荧光校正的PCR仪,QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit适用于其他PCR仪。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

原理

使用QuantiTect Multiplex PCR Kit可确保两步法多重RT-PCR反应的成功(参见QIAGEN multiplex kits)。优化的预混液确保PCR产物在多重反应中的扩增效率和灵敏度与在单一反应中相同。此试剂盒可检测低至10个拷贝的靶基因。

在同一反应液中扩增对照和靶基因,可减少操作误差,提高基因定量分析的可靠性。QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有浓度平衡的K+、NH4+和独特合成的MP因子,可促使引物和探针与核酸模板稳定、高效的退火,提高PCR效率(参见Unique PCR buffer)。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase具有严谨的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,保证被污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。

QuantiTect Multiplex PCR Kit的组分
组分 特点 优势
HotStarTaq DNA Polymerase 在95ºC下15分钟即可活化 在室温下构建qPCR反应
QuantiTect Multiplex PCR Buffer 比例平衡的NH4+和K+ 特异性引物退火,确保可靠的PCR结果
Synthetic Factor MP 在同一管中对至多4个基因进行可靠的多重分析
dNTP混合液 包含dUTP,部分替代dTTP,可选用UNG处理 选用UNG处理,可消除PCR产物残留污染
ROX染料* 在Applied Biosystems或Agilent仪器上可标准化荧光信号 在需要ROX染料的循环仪上准确定量。不干扰在其他real-time循环仪上的反应。
* 如需查看预混液中是否很有ROX染料,请参见”Choosing the right QuantiTect Multiplex PCR Kit”。

操作流程

QuantiTect Multiplex PCR Kit含有即用型预混液,无需对反应液和循环条件进行优化。操作手册提供了适用于各种real-time PCR仪的实验方案,并列有推荐的染料。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)(不提供)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。

可选预混液中含或不含ROX染料的试剂盒,确保能在各种real-time PCR仪上使用(见表)。ROX浓度已优化,可通过自动数据分析对低拷贝数进行检测。

选择合适的QuantiTect Multiplex PCR Kit
ROX染料 试剂盒 兼容的循环仪
预混液中含有 QuantiTect Multiplex PCR Kit Applied Biosystems的循环仪
预混液中不含 QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit Rotor-Gene系列循环仪,Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche、Agilent和其他供应商的循环仪

我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA,可在两步法real-time RT-PCR中获得出色结果。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,并去除基因组DNA污染。

应用

QuantiTect Multiplex PCR Kit可在各种real-time PCR仪上对cDNA进行基因表达分析,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex PCR Kit。

QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit (40) 货号:204741

QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit (40) 货号:204741

QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit (40)

货  号:204741

产品规格:40

原  产  地:德国

参考价格:1750 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit (40)

204741

使用序列特异性探针进行两步法多重定量RT-PCR,用于基因表达分析

  • 无需优化的多重PCR分析
  • 单次反应分析多个目标序列
  • 灵敏地检测低至10个拷贝的目标序列
  • 可靠的定量检测目标序列和对照基因

QuantiTect Multiplex PCR Kit可通过多重两步法real-time PCR在单管中对5个cDNA进行可靠的定量检测。即用型预混液具有热启动和独特的PCR缓冲液体系,无需优化即可在各种real-time PCR仪上进行高度灵敏、可靠的多重定量PCR。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。该试剂盒有两种规格:QuantiTect Multiplex PCR Kit适用于需要ROX染料进行荧光校正的PCR仪,QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit适用于其他PCR仪。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

原理

使用QuantiTect Multiplex PCR Kit可确保两步法多重RT-PCR反应的成功(参见QIAGEN multiplex kits)。优化的预混液确保PCR产物在多重反应中的扩增效率和灵敏度与在单一反应中相同。此试剂盒可检测低至10个拷贝的靶基因。

在同一反应液中扩增对照和靶基因,可减少操作误差,提高基因定量分析的可靠性。QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有浓度平衡的K+、NH4+和独特合成的MP因子,可促使引物和探针与核酸模板稳定、高效的退火,提高PCR效率(参见Unique PCR buffer)。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase具有严谨的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,保证被污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。

QuantiTect Multiplex PCR Kit的组分
组分 特点 优势
HotStarTaq DNA Polymerase 在95ºC下15分钟即可活化 在室温下构建qPCR反应
QuantiTect Multiplex PCR Buffer 比例平衡的NH4+和K+ 特异性引物退火,确保可靠的PCR结果
Synthetic Factor MP 在同一管中对至多4个基因进行可靠的多重分析
dNTP混合液 包含dUTP,部分替代dTTP,可选用UNG处理 选用UNG处理,可消除PCR产物残留污染
ROX染料* 在Applied Biosystems或Agilent仪器上可标准化荧光信号 在需要ROX染料的循环仪上准确定量。不干扰在其他real-time循环仪上的反应。
* 如需查看预混液中是否很有ROX染料,请参见”Choosing the right QuantiTect Multiplex PCR Kit”。

操作流程

QuantiTect Multiplex PCR Kit含有即用型预混液,无需对反应液和循环条件进行优化。操作手册提供了适用于各种real-time PCR仪的实验方案,并列有推荐的染料。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)(不提供)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。

可选预混液中含或不含ROX染料的试剂盒,确保能在各种real-time PCR仪上使用(见表)。ROX浓度已优化,可通过自动数据分析对低拷贝数进行检测。

选择合适的QuantiTect Multiplex PCR Kit
ROX染料 试剂盒 兼容的循环仪
预混液中含有 QuantiTect Multiplex PCR Kit Applied Biosystems的循环仪
预混液中不含 QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit Rotor-Gene系列循环仪,Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche、Agilent和其他供应商的循环仪

我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA,可在两步法real-time RT-PCR中获得出色结果。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,并去除基因组DNA污染。

应用

QuantiTect Multiplex PCR Kit可在各种real-time PCR仪上对cDNA进行基因表达分析,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex PCR Kit。

产品详细信息

QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit (40)

204741

使用序列特异性探针进行两步法多重定量RT-PCR,用于基因表达分析

  • 无需优化的多重PCR分析
  • 单次反应分析多个目标序列
  • 灵敏地检测低至10个拷贝的目标序列
  • 可靠的定量检测目标序列和对照基因

QuantiTect Multiplex PCR Kit可通过多重两步法real-time PCR在单管中对5个cDNA进行可靠的定量检测。即用型预混液具有热启动和独特的PCR缓冲液体系,无需优化即可在各种real-time PCR仪上进行高度灵敏、可靠的多重定量PCR。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。该试剂盒有两种规格:QuantiTect Multiplex PCR Kit适用于需要ROX染料进行荧光校正的PCR仪,QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit适用于其他PCR仪。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

原理

使用QuantiTect Multiplex PCR Kit可确保两步法多重RT-PCR反应的成功(参见QIAGEN multiplex kits)。优化的预混液确保PCR产物在多重反应中的扩增效率和灵敏度与在单一反应中相同。此试剂盒可检测低至10个拷贝的靶基因。

在同一反应液中扩增对照和靶基因,可减少操作误差,提高基因定量分析的可靠性。QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有浓度平衡的K+、NH4+和独特合成的MP因子,可促使引物和探针与核酸模板稳定、高效的退火,提高PCR效率(参见Unique PCR buffer)。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase具有严谨的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,保证被污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。

QuantiTect Multiplex PCR Kit的组分
组分 特点 优势
HotStarTaq DNA Polymerase 在95ºC下15分钟即可活化 在室温下构建qPCR反应
QuantiTect Multiplex PCR Buffer 比例平衡的NH4+和K+ 特异性引物退火,确保可靠的PCR结果
Synthetic Factor MP 在同一管中对至多4个基因进行可靠的多重分析
dNTP混合液 包含dUTP,部分替代dTTP,可选用UNG处理 选用UNG处理,可消除PCR产物残留污染
ROX染料* 在Applied Biosystems或Agilent仪器上可标准化荧光信号 在需要ROX染料的循环仪上准确定量。不干扰在其他real-time循环仪上的反应。
* 如需查看预混液中是否很有ROX染料,请参见”Choosing the right QuantiTect Multiplex PCR Kit”。

操作流程

QuantiTect Multiplex PCR Kit含有即用型预混液,无需对反应液和循环条件进行优化。操作手册提供了适用于各种real-time PCR仪的实验方案,并列有推荐的染料。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)(不提供)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。

可选预混液中含或不含ROX染料的试剂盒,确保能在各种real-time PCR仪上使用(见表)。ROX浓度已优化,可通过自动数据分析对低拷贝数进行检测。

选择合适的QuantiTect Multiplex PCR Kit
ROX染料 试剂盒 兼容的循环仪
预混液中含有 QuantiTect Multiplex PCR Kit Applied Biosystems的循环仪
预混液中不含 QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit Rotor-Gene系列循环仪,Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche、Agilent和其他供应商的循环仪

我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA,可在两步法real-time RT-PCR中获得出色结果。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,并去除基因组DNA污染。

应用

QuantiTect Multiplex PCR Kit可在各种real-time PCR仪上对cDNA进行基因表达分析,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex PCR Kit。

QuantiTect Multiplex PCR Kit (40) 货号:204541

QuantiTect Multiplex PCR Kit (40) 货号:204541

QuantiTect Multiplex PCR Kit (40)

货  号:204541

产品规格:40

原  产  地:德国

参考价格:1750 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

QuantiTect Multiplex PCR Kit (40)

204541

使用序列特异性探针进行两步法多重定量RT-PCR,用于基因表达分析

  • 无需优化的多重PCR分析
  • 单次反应分析多个目标序列
  • 灵敏地检测低至10个拷贝的目标序列
  • 可靠的定量检测目标序列和对照基因

QuantiTect Multiplex PCR Kit可通过多重两步法real-time PCR在单管中对5个cDNA进行可靠的定量检测。即用型预混液具有热启动和独特的PCR缓冲液体系,无需优化即可在各种real-time PCR仪上进行高度灵敏、可靠的多重定量PCR。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。该试剂盒有两种规格:QuantiTect Multiplex PCR Kit适用于需要ROX染料进行荧光校正的PCR仪,QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit适用于其他PCR仪。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

产品

独特的PCR缓冲液。
[A] NH4+防止引物与模板的非特异性结合。[B] MP合成因子是创新的PCR添加剂,能够提高模板处局部的引物浓度,与K+和其他离子一起,MP合成因子能够特异性稳定结合的引物,使HotStarTaq DNA Polymerase作用下的引物延伸更加高效。

性能

QuantiTect Multiplex PCR Master Mix确保在多重扩增反应液中PCR产物扩增的效率和灵敏度与单一扩增反应中相同(参见“三重和单一PCR反应的CΤ值比较”、Comparable results with 4-plex and singleplex PCRsEquivalent CT values in triplex PCR and singleplex PCR)。

三重和单一PCR反应的CΤ值比较
检测t(8;14) 易位序列(20拷贝) 检测GAPDH cDNA序列(106拷贝) 检测NFKB cDNA序列(拷贝数参见第一栏)
105拷贝NFKB的三重PCR 34.31 20.37 21.92
相应的单一PCR 34.07 20.54 21.83
拷贝NFKB的三重PCR 34.61 20.62 25.03
相应的单一PCR 34.00 20.46 25.19
103拷贝NFKB的三重PCR 35.17 19.94 28.38
相应的单一PCR 34.43 20.50 28.65
在ABI PRISM 7900上使用QuantiTect Multiplex PCR Kit对三个序列进行三重或单重PCR扩增。模板是来自Ramos细胞系的140 pg基因组DNA,并带有t(8;14)的易位(目标序列约20个拷贝);106拷贝数的含有人GADPH cDNA序列的线性质粒;105、104或103 拷贝数的含有人NFKB cDNA序列的质粒。通过一次实验模拟了对少量、大量和不同量的靶基因的定量检测。使用了标记有FAM、HEX或Bodipy TMR报告染料及BHQ淬灭序列的TaqMan探针。

此试剂盒可检测低至10个拷贝数的靶基因,即使同一反应液中对照基因的拷贝数是106倍以上(参见Detection of 10 copies of target gene with excess reference geneSuccessful quantitative triplex qPCR of low and high abundance targets对高和低丰度靶基因的进行成功的三重real-time PCR检测)。

对高和低丰度靶基因的进行成功的三重real-time PCR检测
检测CSBG 检测GAPDH 检测HSP
模板预混液1 1400拷贝 106拷贝 2 x 104拷贝
三重PCR的CT 27.73 18.69 23.59
单一PCR的CT 27.08 18.89 23.52
模板预混液2 140拷贝 106拷贝 2 x 103拷贝
三重PCR的CT 31.11 19.00 27.05
单一PCR的CT 30.66 18.61 26.97
模板预混液3 14拷贝 106拷贝 2 x 102拷贝
三重PCR的CT 34.74 18.98 30.71
单一PCR的CT 33.84 19.01 30.38
在LightCycler 2.0系统上使用QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit对三个序列(CSBG、GAPDH和HSP)进行了三重或多重PCR扩增。三种模板混有不同含量的人基因组DNA(用于CSBG扩增)、线性质粒 (用于GADPH扩增)和人白细胞cDNA(用于HSP扩增)。反应含有两个平行。 TaqMan探针标记有FAM、HEX或Texas Red染料。表中显示了大约的目标序列拷贝数和三重及单重PCR的CT值。数据表明,在存在大量(106拷贝)GADPH序列的情况下检测少至14拷贝的CSBG序列,三重和单重PCR具有相当的CΤ值。CSBG:假丝酵母溶解β-葡聚糖;GADPH:甘油三磷酸脱氢酶;HSP:热激蛋白

原理

使用QuantiTect Multiplex PCR Kit可确保两步法多重RT-PCR反应的成功(参见QIAGEN multiplex kits)。优化的预混液确保PCR产物在多重反应中的扩增效率和灵敏度与在单一反应中相同。此试剂盒可检测低至10个拷贝的靶基因。

在同一反应液中扩增对照和靶基因,可减少操作误差,提高基因定量分析的可靠性。QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有浓度平衡的K+、NH4+和独特合成的MP因子,可促使引物和探针与核酸模板稳定、高效的退火,提高PCR效率(参见Unique PCR buffer)。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase具有严谨的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,保证被污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。

QuantiTect Multiplex PCR Kit的组分
组分 特点 优势
HotStarTaq DNA Polymerase 在95ºC下15分钟即可活化 在室温下构建qPCR反应
QuantiTect Multiplex PCR Buffer 比例平衡的NH4+和K+ 特异性引物退火,确保可靠的PCR结果
Synthetic Factor MP 在同一管中对至多4个基因进行可靠的多重分析
dNTP混合液 包含dUTP,部分替代dTTP,可选用UNG处理 选用UNG处理,可消除PCR产物残留污染
ROX染料* 在Applied Biosystems或Agilent仪器上可标准化荧光信号 在需要ROX染料的循环仪上准确定量。不干扰在其他real-time循环仪上的反应。
* 如需查看预混液中是否很有ROX染料,请参见”Choosing the right QuantiTect Multiplex PCR Kit”。

操作流程

QuantiTect Multiplex PCR Kit含有即用型预混液,无需对反应液和循环条件进行优化。操作手册提供了适用于各种real-time PCR仪的实验方案,并列有推荐的染料。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)(不提供)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。

可选预混液中含或不含ROX染料的试剂盒,确保能在各种real-time PCR仪上使用(见表)。ROX浓度已优化,可通过自动数据分析对低拷贝数进行检测。

选择合适的QuantiTect Multiplex PCR Kit
ROX染料 试剂盒 兼容的循环仪
预混液中含有 QuantiTect Multiplex PCR Kit Applied Biosystems的循环仪
预混液中不含 QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit Rotor-Gene系列循环仪,Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche、Agilent和其他供应商的循环仪

我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA,可在两步法real-time RT-PCR中获得出色结果。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,并去除基因组DNA污染。

应用

QuantiTect Multiplex PCR Kit可在各种real-time PCR仪上对cDNA进行基因表达分析,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex PCR Kit。

产品详细信息

QuantiTect Multiplex PCR Kit (40)

204541

使用序列特异性探针进行两步法多重定量RT-PCR,用于基因表达分析

  • 无需优化的多重PCR分析
  • 单次反应分析多个目标序列
  • 灵敏地检测低至10个拷贝的目标序列
  • 可靠的定量检测目标序列和对照基因

QuantiTect Multiplex PCR Kit可通过多重两步法real-time PCR在单管中对5个cDNA进行可靠的定量检测。即用型预混液具有热启动和独特的PCR缓冲液体系,无需优化即可在各种real-time PCR仪上进行高度灵敏、可靠的多重定量PCR。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。该试剂盒有两种规格:QuantiTect Multiplex PCR Kit适用于需要ROX染料进行荧光校正的PCR仪,QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit适用于其他PCR仪。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

产品

独特的PCR缓冲液。
[A] NH4+防止引物与模板的非特异性结合。[B] MP合成因子是创新的PCR添加剂,能够提高模板处局部的引物浓度,与K+和其他离子一起,MP合成因子能够特异性稳定结合的引物,使HotStarTaq DNA Polymerase作用下的引物延伸更加高效。

性能

QuantiTect Multiplex PCR Master Mix确保在多重扩增反应液中PCR产物扩增的效率和灵敏度与单一扩增反应中相同(参见“三重和单一PCR反应的CΤ值比较”、Comparable results with 4-plex and singleplex PCRsEquivalent CT values in triplex PCR and singleplex PCR)。

三重和单一PCR反应的CΤ值比较
检测t(8;14) 易位序列(20拷贝) 检测GAPDH cDNA序列(106拷贝) 检测NFKB cDNA序列(拷贝数参见第一栏)
105拷贝NFKB的三重PCR 34.31 20.37 21.92
相应的单一PCR 34.07 20.54 21.83
拷贝NFKB的三重PCR 34.61 20.62 25.03
相应的单一PCR 34.00 20.46 25.19
103拷贝NFKB的三重PCR 35.17 19.94 28.38
相应的单一PCR 34.43 20.50 28.65
在ABI PRISM 7900上使用QuantiTect Multiplex PCR Kit对三个序列进行三重或单重PCR扩增。模板是来自Ramos细胞系的140 pg基因组DNA,并带有t(8;14)的易位(目标序列约20个拷贝);106拷贝数的含有人GADPH cDNA序列的线性质粒;105、104或103 拷贝数的含有人NFKB cDNA序列的质粒。通过一次实验模拟了对少量、大量和不同量的靶基因的定量检测。使用了标记有FAM、HEX或Bodipy TMR报告染料及BHQ淬灭序列的TaqMan探针。

此试剂盒可检测低至10个拷贝数的靶基因,即使同一反应液中对照基因的拷贝数是106倍以上(参见Detection of 10 copies of target gene with excess reference geneSuccessful quantitative triplex qPCR of low and high abundance targets对高和低丰度靶基因的进行成功的三重real-time PCR检测)。

对高和低丰度靶基因的进行成功的三重real-time PCR检测
检测CSBG 检测GAPDH 检测HSP
模板预混液1 1400拷贝 106拷贝 2 x 104拷贝
三重PCR的CT 27.73 18.69 23.59
单一PCR的CT 27.08 18.89 23.52
模板预混液2 140拷贝 106拷贝 2 x 103拷贝
三重PCR的CT 31.11 19.00 27.05
单一PCR的CT 30.66 18.61 26.97
模板预混液3 14拷贝 106拷贝 2 x 102拷贝
三重PCR的CT 34.74 18.98 30.71
单一PCR的CT 33.84 19.01 30.38
在LightCycler 2.0系统上使用QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit对三个序列(CSBG、GAPDH和HSP)进行了三重或多重PCR扩增。三种模板混有不同含量的人基因组DNA(用于CSBG扩增)、线性质粒 (用于GADPH扩增)和人白细胞cDNA(用于HSP扩增)。反应含有两个平行。 TaqMan探针标记有FAM、HEX或Texas Red染料。表中显示了大约的目标序列拷贝数和三重及单重PCR的CT值。数据表明,在存在大量(106拷贝)GADPH序列的情况下检测少至14拷贝的CSBG序列,三重和单重PCR具有相当的CΤ值。CSBG:假丝酵母溶解β-葡聚糖;GADPH:甘油三磷酸脱氢酶;HSP:热激蛋白

原理

使用QuantiTect Multiplex PCR Kit可确保两步法多重RT-PCR反应的成功(参见QIAGEN multiplex kits)。优化的预混液确保PCR产物在多重反应中的扩增效率和灵敏度与在单一反应中相同。此试剂盒可检测低至10个拷贝的靶基因。

在同一反应液中扩增对照和靶基因,可减少操作误差,提高基因定量分析的可靠性。QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有浓度平衡的K+、NH4+和独特合成的MP因子,可促使引物和探针与核酸模板稳定、高效的退火,提高PCR效率(参见Unique PCR buffer)。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase具有严谨的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect Multiplex PCR Master Mix含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,保证被污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。

QuantiTect Multiplex PCR Kit的组分
组分 特点 优势
HotStarTaq DNA Polymerase 在95ºC下15分钟即可活化 在室温下构建qPCR反应
QuantiTect Multiplex PCR Buffer 比例平衡的NH4+和K+ 特异性引物退火,确保可靠的PCR结果
Synthetic Factor MP 在同一管中对至多4个基因进行可靠的多重分析
dNTP混合液 包含dUTP,部分替代dTTP,可选用UNG处理 选用UNG处理,可消除PCR产物残留污染
ROX染料* 在Applied Biosystems或Agilent仪器上可标准化荧光信号 在需要ROX染料的循环仪上准确定量。不干扰在其他real-time循环仪上的反应。
* 如需查看预混液中是否很有ROX染料,请参见”Choosing the right QuantiTect Multiplex PCR Kit”。

操作流程

QuantiTect Multiplex PCR Kit含有即用型预混液,无需对反应液和循环条件进行优化。操作手册提供了适用于各种real-time PCR仪的实验方案,并列有推荐的染料。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)(不提供)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。

可选预混液中含或不含ROX染料的试剂盒,确保能在各种real-time PCR仪上使用(见表)。ROX浓度已优化,可通过自动数据分析对低拷贝数进行检测。

选择合适的QuantiTect Multiplex PCR Kit
ROX染料 试剂盒 兼容的循环仪
预混液中含有 QuantiTect Multiplex PCR Kit Applied Biosystems的循环仪
预混液中不含 QuantiTect Multiplex PCR NoROX Kit Rotor-Gene系列循环仪,Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche、Agilent和其他供应商的循环仪

我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA,可在两步法real-time RT-PCR中获得出色结果。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,并去除基因组DNA污染。

应用

QuantiTect Multiplex PCR Kit可在各种real-time PCR仪上对cDNA进行基因表达分析,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Multiplex PCR Kit。